[发明专利]高纯度羟基红花黄素A的提取方法

权利要求书

1.一种高纯度羟基红花黄素A的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、红花挥发性成分提取：将粉碎过的红花药材置于超临界仪器中1000mL的萃取釜中以超临界CO2流体进行萃取得到红花超临界萃取物；

步骤二、羟基红花黄素A的提取：向所述步骤一得到的红花超临界萃取物中加入醇水混合物，将温度升高到30～70℃，搅拌下提取1～4小时得到红花水提取液；

步骤三、羟基红花黄素A的纯化：首先，将所述步骤二得到的红花水提取液采用纳滤装置进行富集和初步纯化；其次，采用离子交换树脂吸附洗脱得洗脱液；

步骤四、将所述步骤三得到的洗脱液进行浓缩至干，将所得固体加入乙酸乙酯中，加入活性炭，搅拌下加热回流，趁热过滤，滤液于-20℃～-5℃下冷却6～10小时，真空抽滤，2～3倍体积冷乙酸乙酯淋洗，所得固体在20～30℃真空干燥得羟基红花黄素A。

2.如权利要求1所述的高纯度羟基红花黄素A的提取方法，其特征在于，所述步骤一中超临界CO2流体进行萃取的条件为：萃取温度为40～50℃、萃取压力为20～25MPa、萃取时间为2.5～4.0h。

3.如权利要求1所述的高纯度羟基红花黄素A的提取方法，其特征在于，所述步骤二中醇水混合物中醇水的体积比为1:5～30；提取条件为：提取温度为40～50℃、料液体积比为1:15～20、提取时间为2.5～4.5h。

4.如权利要求1所述的高纯度羟基红花黄素A的提取方法，其特征在于，所述步骤三中，采用纳滤装置进行富集和初步纯化具体包括步骤：采用型号为UOF～4中空纤维膜为组件的纳滤装置，以20～30L/h，压力为0.2～0.4兆帕的流速进行浓缩，截留分子量为5000以上，得透过液。

5.如权利要求1所述的高纯度羟基红花黄素A的提取方法，其特征在于，所述步骤三中，采用离子交换树脂吸附洗脱得洗脱液具体包括步骤：将充分溶胀好的离子交换树脂进行湿法上柱，采用径高比为1:10～20上柱量，用80～95％乙醇进行洗柱，洗至采用1L洗柱液加水不显白色浊液为止，用大量蒸馏水洗至离子交换树脂无醇味，加40～50％乙醇洗脱液平衡1～3h，分离红花水提液30～50L，按1～3％柱体积上样，洗脱速度为1～3L/min，洗脱液浓度为40～50％乙醇，分管收集洗脱液，用聚酰胺薄膜分析收集到的洗脱液，按此方法重复分离三次，将经过三次分离后得到的分离液按体积比1.5～3.0﹕l，30～50℃减压浓缩，取浓缩后的分离液1mL置于10mL容量瓶中定容，并用紫外可见分光光度计测得吸光度数据记录。

6.如权利要求1所述的高纯度羟基红花黄素A的提取方法，其特征在于，所述步骤二还包括步骤：移取一定量的提取液，稀释一定的倍数，用紫外分光光度计测量其吸光度，根据吸光度和浓度在一定的范围内呈线性关系来计算其浓度，提取率的计算公式为：

式中，C为n次提取液混合后溶液中羟基红花黄素A的浓度mg/mL；V为n次提取液混合后溶液的总体积mL；M0为所用红花药材的质量mg。

7.如权利要求1所述的高纯度羟基红花黄素A的提取方法，其特征在于，所述步骤一中，粉碎过的红花药材的粉碎步骤具体包括：采用动态高压微射流超微化技术，对红花药材进行超微化粉碎至粒度为200～300目，其中超微化粉碎的工作压力为115～118Mpa，工作温度为22～24℃。

8.如权利要求5所述的高纯度羟基红花黄素A的提取方法，其特征在于，所述离子交换树脂为Amberlite XAD系列吸附树脂。