[发明专利]特定凝集素组合在制备用以鉴别上皮性卵巢癌的测试载体方面的用途以及试剂盒

说明书

本发明提出了一种特定凝集素组合在制备用以鉴别上皮性卵巢癌的测试载体方面的用途以及试剂盒。针对唾液样本，所述特定凝集素组合为：(1)PSA、SNA、MAL‑II、ECA和HHL的组合，对应于健康人群；(2)PHA‑E、LTL和PNA的组合，对应于良性卵巢疾病患者；(3)RCA120、UEA‑I、ConA、LCA、AAL、WFA、WGA、DBA、VVA、NPA和GNA的组合，对应于上皮性卵巢疾病患者。通过凝集素与唾液中糖蛋白糖链特异性结合，可以快速检测出患者唾液样品中差异性表达的糖蛋白和糖链结构，实现了对样本中多种糖蛋白和糖链结构的快速、高通量检测。

技术领域

本发明涉及一种基于唾液糖蛋白鉴别上皮性卵巢癌的凝集素用途以及试剂盒。

背景技术

卵巢癌(Ovarian cancer,OC)是常见的女性生殖系统肿瘤之一，在全球常见癌症中居第六位，常见女性癌症中居第五位，死亡人数在导致全球女性死亡的主要癌症中列第七位。近年来，卵巢癌发病率在我国呈上升趋势，预计2016年我国卵巢癌发病率将达到6.43/10万人；由于缺乏明显的鉴别性体征和筛查方法、卵巢癌的早期诊断十分困难。临床研究表明，早期阶段(I/II)确诊的卵巢癌患者5年生存率可达90％以上，然而，约70％-85％的患者在确诊时都已处于晚期阶段(III/IV期)，平均5年存活率仅有20％-35％，致使卵巢癌成为病死率最高的妇科恶性肿瘤。卵巢癌中85％～90％的病理类型是上皮性卵巢癌(EOC)。鉴于患者的生存率与确诊时的疾病分期密切相关，早期检测成为提高卵巢癌生存期的关键。

在人体内，糖分子主要以单糖或寡聚糖的形式存在，寡糖链既是糖复合物(糖蛋白、糖脂等)的重要组成部分，同时也具有重要的生物学功能。作为一种，蛋白质糖基化修饰是最重要的翻译后修饰之一。研究表明，70％的人类蛋白质含有一个或多个糖链，这些糖链由甘露糖、半乳糖及N-乙酰葡糖胺等十几种单糖组成，经不同糖基转移酶、糖苷酶及磺基转移酶的催化以不同的连接方式可构成庞大的糖链谱。

在细胞恶变和肿瘤发生、发展的过程中，糖基化异常是一个普遍现象，而且这种改变常早于糖蛋白表达量的变化。鉴于目前所发现的卵巢癌标志物均为糖蛋白，因此对其糖基化模式和糖链结构做精细的解析，从中寻找或发现新的特异性肿瘤标志物，成为近年来卵巢癌生物标志物研究的新热点。相较于蛋白质和脂质部分，糖链的改变往往是对机体生理、病理状态变化的应答更灵敏，因此研究糖复合物糖基化模式可以提高肿瘤蛋白标志物检测的特异性与灵敏度，为癌症早期发现、诊断、预后及耐药性监测提供新的方法。

初步的研究显示，特异性的血清N-糖链结构，能够有效的鉴别卵巢癌和健康对照，有可能为卵巢癌的检测提供具有更高准确性、灵敏度和特异性的生物标志物。留一法交叉验证，以特异性N-糖链为标志物，对卵巢癌的鉴别敏感度达86％、特异性为95.8％。

唾液是由唾液腺、颌下腺等汇聚形成的无色无味、弱酸性的混合性低渗液体，是人体内重要的体液之一，组成成分虽极为复杂，却相对稳定。有研究数据显示人类唾液中蛋白总量高达0.5～3g·L-1，从中鉴定出1166种有代表性的蛋白，其中192种唾液蛋白同时存在于血浆蛋白中。唾液糖蛋白组构成的改变能够反映人体生理状态的变化，通过比对唾液糖蛋白组的组成成分，能够为洞悉机体的生理状态和身体的各种变化过程提供一个客观的观察指标。如前所述，蛋白质的异常糖基化是肿瘤发生的一个重要标志。唾液蛋白中糖基化蛋白的比例较高，且多为N-糖链糖蛋白。因此，人类唾液成为糖蛋白的理想来源。加之唾液糖蛋白与血清糖蛋白具有高度的相似性，唾液糖蛋白的组成和丰度，可以很好的反映血液中各种糖蛋白水平的变化。鉴于唾液与人体健康及疾病状态密切相关性，作为重要的人体液个人信息库之一，唾液标本用于临床疾病的早期诊断、不仅可用于口腔局部疾病的有效治疗和疾病预防，还可用于全身系统性疾病的诊断、病程监控和健康的评估。