[发明专利]一株多抑制物胁迫耐受性酿酒酵母及制备方法、应用

权利要求书

1.一株多抑制物胁迫耐受性酿酒酵母（Saccharomyces Cerevisiae），其特征在于，该菌株名称为S288C-YOL032W，菌株的保藏编号为CGMCC No.13926，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2017年03月24日；该菌株携带有YOL032W基因，该基因GenBank登录号为NM_001183286.1。

2.一种制备如权利要求1所述的一株多抑制物胁迫耐受性酿酒酵母的方法，其特征在于，包括如下步骤：以自絮凝酵母SPSC01基因组为模板，通过PCR扩增得到的YOL032W基因连接到pHO组成型整合表达载体，线性化后转入酿酒酵母S288C，实现整合表达。

3.一种制备如权利要求1所述的一株多抑制物胁迫耐受性酿酒酵母的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1磷脂合成蛋白基因 YOL032W 的重组酿酒酵母的构建和转化

S1.1自絮凝酵母SPSC01基因组DNA提取；

S1.2 PCR扩增目标基因条带；

S1.3 目标片段酶切；

S1.4 目的基因与载体连接；

S1.5 连接产物在大肠杆菌DH5α中转化；

S1.6 重组质粒的线性化；

S2 磷脂合成蛋白基因 YOL032W 的酿酒酵母转化

S2.1 酿酒酵母电转化感受态细胞的制备；

S2.2 电转化法获得重组酵母转化子。

4.如权利要求1所述的酿酒酵母在抑制物胁迫条件下燃料乙醇生产中的应用。

5.如权利要求4所述的酿酒酵母在抑制物胁迫条件下燃料乙醇生产中的应用，其特征在于，所述的抑制物胁迫条件为10g/L的乙酸、3g/L的糠醛和2g/L的香草醛。