[发明专利]一种固定化脂肪酶及其制备方法有效
申请号: | 201711209176.8 | 申请日: | 2017-11-27 |
公开(公告)号: | CN108130319B | 公开(公告)日: | 2021-07-13 |
发明(设计)人: | 胡云峰;徐珊;李任强;张继福;张云;孙爱君 | 申请(专利权)人: | 中国科学院南海海洋研究所 |
主分类号: | C12N9/20 | 分类号: | C12N9/20;C12N11/084;C12N11/10;C12N11/12 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人: | 刘明星;胡素丽 |
地址: | 511458 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 固定 脂肪酶 及其 制备 方法 | ||
1.一种固定化脂肪酶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将复配载体和脂肪酶分别溶于pH7.0的磷酸缓冲液中,得到质量分数4%的复配载体溶液和800U/mL的脂肪酶溶液,将复配载体溶液和脂肪酶溶液按体积比1:1的比例混合均匀,得到复配载体/脂肪酶混合液,然后将复配载体/脂肪酶混合液滴加到含有交联剂和氯化钙的混合液中,形成凝胶小球后再交联固定,经洗涤、抽滤后得到固定化脂肪酶;
所述的复配载体包括质量比为5:3的载体A和载体B,所述的载体A为海藻酸钠,所述的载体B为羧甲基纤维素钠;所述的混合液中交联剂的浓度为体积分数0.02%,氯化钙的浓度为质量分数5%,所述的交联剂为乙二醇缩水甘油醚。
2.根据权利要求1所述的固定化脂肪酶的制备方法,其特征在于,所述的交联固定是在4℃交联固定20~50min。
3.根据权利要求1或2所述的固定化脂肪酶的制备方法,其特征在于,具体步骤为:将复配载体溶于pH 7.0的磷酸缓冲液中,得到质量分数4%的复配载体溶液,所述的复配载体包括质量比为5:3的海藻酸钠和羧甲基纤维素钠,将脂肪酶溶于pH 7.0的磷酸缓冲液中,配制800U/mL的脂肪酶溶液,将复配载体溶液和脂肪酶溶液按体积比1:1的比例混合均匀,得到复配载体/脂肪酶混合液,然后将复配载体/脂肪酶混合液用注射器滴加到含有乙二醇二缩水甘油醚和氯化钙的混合液中,所述的混合液中的乙二醇二缩水甘油醚的浓度为体积分数0.02%,氯化钙的浓度为质量分数5%,形成凝胶小球后置于4℃交联固定30min,经洗涤、抽滤后得到固定化脂肪酶。
4.一种按照权利要求1或2所述的固定化脂肪酶的制备方法制备得到的固定化脂肪酶。
5.一种按照权利要求3所述的固定化脂肪酶的制备方法制备得到的固定化脂肪酶。
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