[发明专利]一种蝴蝶兰组织培养中外植体消毒的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种蝴蝶兰蝴蝶兰组织培养中外植体消毒的方法。

背景技术

蝴蝶兰(Phalaenopsis aphrodite Rchb.F.)为兰科蝴蝶兰属，原产于亚热带雨林地区，为附生性兰花。蝴蝶兰白色粗大的气根露在叶片周围，除了具有吸收空气中养分的作用外，还有生长和光合作用。新春时节，蝴蝶兰植株从叶腋中抽出长长的花梗，并且开出形如蝴蝶飞舞般的花朵，深受花迷们的青睐，素有“洋兰王后”之称。为了满足花卉市行业的需求，传统的蝴蝶兰种植方式已经难以满足市场需求，因此目前蝴蝶兰最常用的种植方法是利用其组织进行无性繁殖，这样既能够大量繁殖植株、有能够是子代蝴蝶兰符合母本的表型性状，应用前景良好。

植物组织培养用的外植体材料大部分取自田间，但因为在植物表面上附着大量的微生物。因此在植物材料接种前必须要进行消毒处理，目的是既要求把材料表面上的各种微生物杀灭，同时又不能损伤或只轻微损伤植物材料而不至于影响其生长。因此，外植体的消毒处理是植物组织培养工作中的重要的一环。目前在组织培养中常用的外植体消毒过程中主要存在以下突出问题：外植体处理不当，导致外植体成活率低或外植体消毒不彻底，导致污染率高，影响了组培繁殖的效率和产量。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种组织培养中外植体消毒方法，该消毒方法对外植体消毒彻底，且损伤率降低。

一种蝴蝶兰组织培养中外植体消毒的方法，其特征在于包括以下步骤：

S1:清洗干净外植体表面，得到清洗后外植体；

S2:将所述清洗后外植体浸泡在75％的酒精中，在第一设定温度条件下超声波震荡第一预设时间，得到第一预处理外植体；

S3:将所述第一预处理外植体浸泡在2％-4％的NaClO溶液中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第二预处理外植体；

S4:将所述第二预处理外植体浸泡在无菌水中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第三预处理外植体；

S5:无菌水冲洗所述第三预处理外植体，得到消毒后外植体.。

优选地，清洗干净外植体表面实现为：将外植体用自来水冲洗外植体表面 30-35min。

优选地，在第一设定温度条件下超声波震荡第一预设时间实现为：

升温至40℃，并在40℃条件下，同时利用120W的超声波震荡10-20s。

优选地，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间实现为：

升温至40℃，并在40℃条件下，同时利用120W的超声波震荡5-10min。

优选地，冲洗所述第三预处理外植体包括：利用无菌水冲洗所述第三预处理外植体材料10-15min。

从上述的技术方案可以看出，本发明实施例的组织培养中外植体消毒方法合理使用洗剂，并配合清洁/振动的技术，对外植体进行一系列消毒操作，由于时间、步骤及清洗剂配比的正确选择，外植体清洁效果显著且外植体存活率高，达到了提高清洁效果及降低损伤率的技术目的。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

一种蝴蝶兰组织培养中外植体消毒的方法，其特征在于包括以下步骤：

S1:清洗干净外植体表面，得到清洗后外植体；

S2:将所述清洗后外植体浸泡在75％的酒精中，在第一设定温度条件下超声波震荡第一预设时间，得到第一预处理外植体；

S3:将所述第一预处理外植体浸泡在2％-4％的NaClO溶液中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第二预处理外植体；

S4:将所述第二预处理外植体浸泡在无菌水中，在所述第一设定温度条件下超声波震荡第二预设时间，得到第三预处理外植体；

S5:无菌水冲洗所述第三预处理外植体，得到消毒后外植体.。

作为具体实施例的改进，清洗干净外植体表面实现为：将外植体用自来水冲洗外植体表面30-35min。

作为具体实施例的改进，在第一设定温度条件下超声波震荡第一预设时间实现为：

升温至40℃，并在40℃条件下，同时利用120W的超声波震荡10-20s。