[发明专利]一种可用于曼氏无针乌贼与金乌贼种间鉴定的分子标记及应用在审
| 申请号： | 201711091693.X | 申请日： | 2017-11-08 |
| 公开（公告）号： | CN107904314A | 公开（公告）日： | 2018-04-13 |
| 发明（设计）人： | 李荣华;卢少坤;陈炼;王春琳;宋微微;母昌考;刘磊;史策 | 申请（专利权）人： | 宁波大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 宁波诚源专利事务所有限公司33102 | 代理人： | 张一平,叶桂萍 |
| 地址： | 315211 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 曼氏无针 乌贼 金乌 贼种间 鉴定 分子 标记 应用 | ||
1.一种可用于曼氏无针乌贼与金乌贼种间鉴定的SNP分子标记，其特征在于：所述SNP分子标记的正向引物F1为5'CAGGAACAGTTTCCACTACCCCTAC 3'；反向引物F2为5'CGCGTACATATCGCCCGTC 3'。
2.一种根据权利要求1所述的SNP分子标记在基于高分辩率溶解曲线鉴定曼氏无针乌贼与金乌贼中的应用。
3.根据权利要求2所述的SNP分子标记在基于高分辩率溶解曲线鉴定曼氏无针乌贼与金乌贼中的应用，其特征在于：所述曼氏无针乌贼目标扩增片段中的SNP为：CAGGAACAGTTTCCACTACCCCTACTATGTTACGACTTATCTTATTTTATCAACAAGAGCGACGGGCGATATGTACGCATTACAAAACCAAAACA。
4.根据权利要求2所述的SNP分子标记在基于高分辩率溶解曲线鉴定曼氏无针乌贼与金乌贼中的应用，其特征在于：所述金乌贼目标扩增片段中的SNP为：CAGGAACAGTTTCCACTACCCCTACTATGTTACGACTTATCTTATTTTACCAACAAGAGCGACGGGCGATATGTACGCGCTATAAAACCTGATTC。
5.一种基于高分辨率溶解曲线鉴定曼氏无针乌贼与金乌贼的方法，其特征在于：以曼氏无针乌贼与金乌贼基因组DNA为模板，根据曼氏无针乌贼与金乌贼的基因组的标签序列设计引物进行PCR扩增，利用扩增产物在高分辨率熔解曲线中的Tm值差异进而区分；以待鉴定乌贼基因组DNA为模板，根据乌贼的基因序列设计引物进行PCR扩增，利用扩增产物在高分辨率熔解曲线中的Tm值差异进而区分乌贼相近物种。
6.根据权利要求5所述的基于高分辨率溶解曲线鉴定曼氏无针乌贼与金乌贼的方法，其特征在于：通过上述扩增获得的PCR产物，添加核酸饱和染料后变性处理，冷却至室温进行HRM测定。
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