[发明专利]羊角的薄层色谱鉴别方法

说明书

本发明公开了一种羊角的薄层色谱鉴别方法，通过分别鉴别羊角胆固醇成分和亮氨酸、缬氨酸、甘氨酸成分的薄层色谱，鉴别羊角。本发明操作方便、设备简单、显色容易，同时展开速率快，规范了羊角的鉴别方法。

技术领域

本发明涉及中医药鉴别技术领域，具体是羊角的薄层色谱鉴别方法。

背景技术

羊角为牛科动物山羊Capra hircus L. 的角，宰杀羊时，锯取其角，干燥即得。羊角呈扭曲的长锥形，略呈弓形，一面较平或略向内凹，一面凸起，长15～30cm，基部直径约3～5cm。表面灰黑色、灰白色、棕黑色或淡棕色。先端具纵纹或纵裂纹。自基部向上有7～20个较密集的波状环脊，脊间距约0.5cm。基部切面扁圆形，角塞中部呈空洞状，污白色或黄白色，骨质；角鞘灰黑色或灰白色，角质。质坚硬。气微腥，味淡。羊角的化学成分包括甾族及磷脂类成分与角蛋白、多肽及氨基酸类成分，甾族及磷脂类成分：胆固醇、卵磷脂、脑磷脂、神经鞘磷脂、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇等；角蛋白、多肽及氨基酸类成分：天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、组氨酸、精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、酪氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、脯氨酸等游离氨基酸。羊角具有增强抵抗流感病毒和提高机体免疫功能的作用，解热、降压作用，对中枢神经的抑制作用，对平滑肌的作用。羊角经常被制作成梳子、吊坠等，也可以入药，如羊角是复方羊角片的主要成分。羊角的药用价值越来越被人们所重视，但是至今关于羊角的鉴别方法却少有报道，羊角的质量检测标准也没有得到规范。

发明内容

基于此，本发明提供了一种羊角的薄层色谱鉴别方法，通过分别鉴别羊角胆固醇成分和亮氨酸、缬氨酸、甘氨酸成分的薄层色谱，鉴别羊角。本发明操作方便、设备简单、显色容易，同时展开速率快，规范了羊角的鉴别方法。

为实现上述技术目的，具体鉴别方法包括以下步骤：

（1）收集样品，确定对照药材，然后对样品进行粉碎处理，并过二号筛，备用；

（2）考察样品的适用性，主要考察水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物四项指标，分别根据《中国药典》2015年版四部通则里0832第二法、2302项下总灰分测定法、2302项下酸不溶性灰分测定法和2201项测定，拟定指标的限度；

（3）含量测定：羊角为动物药，富含氨基酸、蛋白质，参照《中国药典》2015年版四部通则0704氮测定法第二法测定羊角总氮含量，拟定总氮含量的限度；

（4）羊角胆固醇成分薄层色谱鉴别：取样品粉末1g，加乙醇10mL，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取胆固醇对照品适量，加乙醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2015年版四部通则0502）试验, 吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（15:2:1:0.6）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点清晰，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

耐用性实验考察：采用点状点样对不同薄层板、不同展开温度：28℃、4℃和不同相对湿度76%、32%进行考察；

（5）羊角甘氨酸、缬氨酸和亮氨酸成分薄层色谱鉴别：取样品粉末1g，加70%乙醇30mL，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加70%乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取羊角对照药材1g，同法制成对照药材溶液。取甘氨酸、缬氨酸、亮氨酸对照品适量，分别加70%乙醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2015年版四部通则0502）试验, 吸取供试品溶液和对照药材溶液各5～10μL，对照品溶液1μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水（3:1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，105℃加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；