[发明专利]一种针对牛肝菌中不同价态汞元素的分离测定方法

说明书

技术领域

本发明属于食品安全检测技术领域，具体涉及一种针对牛肝菌中不同价态汞元素的分离测定方法技术领域。

背景技术

牛肝菌是珍稀食用菌类，富含蛋白质、氨基酸、多糖、维生素及多种矿物质元素，因其味道鲜美，营养丰富，被认为是理想的绿色健康食品，深受国内外消费者喜爱，在国际贸易中牛肝菌是重要的创汇农副产品。食用菌对重金属有很强的富集能力，其中Hg含量超标现象严重，对消费者身体健康和生命安全造成威胁。重金属素的元素效应并不仅仅取决于该元素的总量，而且与该元素的存在形态密切相关，同种元素不同形态之间的毒性存在较大差异。因此在评价重金属对人体的危害时，将其按形态划分更为合理。

自然界的汞主要以金属汞、无机汞(Hg²⁺，Hg⁺)和有机汞(甲基汞、乙基汞)形式存在，汞是具有毒性的一种元素，其对生物体毒性的大小取决于汞的形态及化合物种类，金属状态的汞几乎是无毒的。无机汞的毒性与其水溶性大小有关，毒性远小于有机汞，有机汞因具有脂溶性，易被机体所吸收，尤其是甲基汞，机体吸收率可达100％，对神经系统易造成不可逆的损害。因此，研究牛肝菌或牛肝菌制品中汞元素的化学形态对正确认识牛肝菌中汞元素对人体的危害具有重要意义。

测定汞形态的方法很多。最早的方法为气相色谱法，上世纪80年代以后，原子发射光谱(AES)、原子荧光光谱(AFS)、电感耦合-等离子体质谱(ICP-MS)等元素分析仪器与高效液相色谱(HPLC)联用技术发展的日趋完善，已广泛应用于材料和生命科学样品中元素的形态分析。其中ICP-MS具有极低的检出限、较宽的线性范围、可同时测定多种元素、分析速度快、线性范围宽、灵敏度高等优点，成为形态分折中首选的检测方法。

在新修订的食品安全国家标准GB 5009.17-2014中增加了甲基汞的测定方法(液相色谱-原子荧光光谱联用法)，但标准中所规定的样品前处理方法主要是针对有甲基汞限值规定的鱼类产品且该方法未涉及乙基汞的测定方法，而SN/T 3034-2011规定了出口水产品中无机汞、甲基汞和乙基汞的液相色谱-原子荧光光谱联用方法。目前，尚未有关于利用HPLC-ICP-MS联用技术建立的牛肝菌或牛肝菌制品中汞的不同价态分析方法研究。因此本研究拟用微波萃取、并结合HPLC-ICP-MS测定牛肝菌中的二价汞、甲基汞和乙基汞，为全面客观评价牛肝菌中汞元素的危害性提供技术支撑。

发明内容

本发明的目的在于提供一种采用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用手段测定牛肝菌中不同价态的汞元素含量的方法，采用微波萃取和HPLC-ICP-MS联用的方法，具有简单快速、分离效果好、检出限低、灵敏度高、重复性好、抗干扰能力强的特点。

本发明采用如下技术方案实现。

一种针对牛肝菌中不同价态汞元素的分离测定方法，本发明的分离测定方法包括依序采用微波萃取、高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用的方法对牛肝菌中不同价态汞元素进行分离测定。本发明的分离测定方法对于牛肝菌相关制品同样有效。

进一步为，本发明方法微波萃取步骤中使用的萃取液为盐酸HCl。

进一步为，本发明盐酸萃取液的浓度为0.07mol/L。

本发明包括以下步骤：(Ⅰ)选择仪器及设备；(Ⅱ)配制试剂与标准溶液；(Ⅲ)样品前处理；(Ⅳ)样品测定；具体工艺步骤如下：

(Ⅰ)选择仪器及设备，其中分离测定设备采用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用仪HPLC-ICP-MS，仪器及设备按以下最小配置条件备用：

(1)高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用仪，配有规格为150mm×4.6mm×5μm的Agilent Eclipse plus C18分析柱；

(2)超纯水仪；

(3)刀式混合研磨仪；

(4)环形聚焦单模微波萃取仪；

(5)高速冷冻离心机，最大转速14000r/min；

(6)电子天平，精确度0.0001g；

(7)pH计；

(8)0.2μm水相针式滤器；

(9)冰箱；

(Ⅱ)配制试剂与标准溶液：

(1)标准储备液：以甲醇为溶剂，配制二价汞Hg²⁺、甲基汞MeHg、乙基汞EtHg标准储备液，每种标准储备液的浓度为3μg/mL，避光保存于4℃冰箱中备用；