[发明专利]一种利用核磁共振测定马来酸含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及马来酸含量的测定方法，特别涉及一种利用核磁共振测定马来酸含量的方法。

背景技术

目前，马来酸的含量测定方法主要是高效液相色谱法（参考GB25546-2010），高效液相法一般对纯度的表征有两种方式，一种是外标法，利用买来的标准品作为标准，制作浓度和面积的曲线，然后利用信号在线性范围内，浓度与面积成比例，来获取马来酸的浓度，另一种是归一化法，归一化法本身对于纯度检测由于不同物质在同一波长UV下吸收强度不一致，如果有一个大的杂质吸收很弱，那么对于结果的影响巨大。且归一化法，得到的纯度并没有对无机盐和水分，无紫外的溶剂进行表征，势必影响结果的准确性。

此外高效液相法在测定马来酸纯度时还存在，马来酸结构简单，只有一个烯键是发色基团，本身UV吸收就很弱，这也是高效液相色谱法的短板所在。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用核磁共振测定马来酸含量的方法。主要解决高效液相色谱法存在的耗时长的技术问题。

本发明的技术方案为：一种利用核磁共振测定马来酸含量的方法，包括以下步骤：首先配制摩尔浓度等于1:1的马来酸和对苯二甲酸二甲酯的氘带DMSO溶液，经超声处理后进入核磁共振谱仪，谱图检测完成后，进行傅立叶转换，相位调整，对谱图进行定标和积分，得到马来酸的积分数Au，再根据公式计算得到马来酸含量：

WT%：马来酸的含量

Wu：马来酸的称量重量

Ws：对苯二甲酸二甲酯的称量重量

nu: 马来酸的氢数

ns: 对苯二甲酸二甲酯的氢数

Au：马来酸的积分数

As：对苯二甲酸二甲酯的积分数

Mu：马来酸的分子量

Ms：对苯二甲酸二甲酯的分子量。

本发明的有益效果：在医药，农业，食品中通常作为合成所需的关键原料。在购买原料后，工艺对投料量有当量要求，那么原料的纯度则至关重要，而通常使用的高效液相色谱法，一则需要标准品进行标化，二则需要先制作浓度曲线才能开始测试。加上走系统适用型，空白溶液，整个流程耗时4-6小时，而本方法，直接取样进行检测即可，30min即可拿到结果。在药物研发阶段，马来酸是一种较常用的核磁氢谱定量所使用的内标物。如果用于后期GMP生产,方便研发生产一体化，则需要根据ICH要求对其进行全标，包括高效液相色谱法提供的纯度，减去含水量，炽灼残渣提供的无机盐。一般耗时需要48-54小时。而利用此方法同样可以节省大量时间，提高整体研发效率。

附图说明

图1为本发明核磁共振图谱。

具体实施方式

所需仪器：BRUKER ASCEND 400 MHz 等效仪器或以上；十万分之一天平 等效仪器或以上。

试剂：氘带DMSO，纯度大于99.5%；氘带水，纯度大于99.5%。

所需实验参数:

探头BBO 400S1 BBF-H-D-05 Z SP

脉冲程序zg30

采样点数65536

溶剂DMSO

扫场次数16

空扫次数2

谱宽7211.539 Hz

采样时间4.5438294 sec

增益63.25

温度299.0 K

弛豫时间10.00000000 sec

核1H

脉宽9.73 usec

脉冲功率14.42000008 W

F2 – 处理参数

线宽0.30 Hz

准确称量22mg待测马来酸（Wu）和38mg对苯二甲酸二甲酯标准品（Ws）各三份于1.5ml离心管中，用1ml DMOS-d6溶解，并加以超声15min，转移至核磁管，送入核磁谱仪进行检测，谱图检测完成后，进行傅立叶转换，相位调整，对谱图进行定标，将2.5ppm左右的5重峰定位为2.50ppm，对8.08±0.1ppm的峰进行积分，是为内标物中的芳香区4个氢，积分为4.0000（As），然后对6.28±0.1ppm位置的氢进行积分，得到Au。根据以下公式进行计算：

WT%:马来酸的含量

Wu：马来酸的称量重量

Ws：对苯二甲酸二甲酯的称量重量

nu: 马来酸的氢数

ns: 对苯二甲酸二甲酯的氢数

Au：马来酸的积分数

As：对苯二甲酸二甲酯的积分数

Mu：马来酸的分子量