[发明专利]一种稳定的补体C4检测试剂盒的制备方法

权利要求书

1.一种稳定的补体C4检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)按照下列组分含量配制试剂R1：

试剂R1：

①按照上述试剂R1的组分含量，将磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钾、氯化钠溶于纯化水中，搅拌均匀，待充分溶解，配制成R1缓冲液；

②按照上述试剂R1的组分含量，将聚乙二醇6000、叠氮钠、Tween-20溶于R1缓冲液中，搅拌均匀，待所有原料充分溶解，即制得试剂R1；

(2)按照下列组分含量配制试剂R2：

试剂R2：

①按照上述试剂R2的组分含量，将磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钾、氯化钠溶于纯化水中，搅拌均匀，待充分溶解，配制成R2缓冲液；

②按照上述试剂R2的组分含量，将Tween-20、聚氧乙烯聚丙乙烯共聚物、叠氮钠溶于R2缓冲液中，搅拌均匀，即得分散液；

③制备胶乳包被的羊抗人C4特异抗体颗粒：

a.将胶乳颗粒用PB缓冲液稀释到浓度为1％-5％，每毫升体积溶液中加入EDAC 1.6mg，室温反应2h，10000-20000rpm转速下离心30-40min，去上清，将沉淀悬浮于MES缓冲液中，超声分散；

b.再于10000-20000rpm转速下离心30-40min，弃上清，将沉淀悬浮于PB缓冲液中，使其中的胶乳颗粒最终浓度为3.0％，超声分散；接着，边搅拌边加入等体积的含羊抗人C4特异抗体的PB稀释液，混合搅拌，室温反应2h，其中的胶乳颗粒最终浓度为1.5％；

c.10000-20000rpm转速下离心30-40min，弃上清，沉淀悬浮MES缓冲液中，超声分散，加入BSA，4℃封闭过夜，离心去上清后，得最终所需的胶乳包被的羊抗人C4特异抗体颗粒；

④用分散液来溶解得到的胶乳包被的羊抗人C4特异抗体颗粒，使其中的胶乳颗粒终浓度为0.1-2.0％，超声分散，最终制得试剂R2。

2.根据权利要求1所述的稳定的补体C4检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述制备胶乳包被的羊抗人C4特异抗体颗粒的过程的步骤a中，采用的胶乳颗粒原料为粒径为50-80nm的胶乳颗粒。

3.根据权利要求1所述的稳定的补体C4检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述制备胶乳包被的羊抗人C4特异抗体颗粒的过程的步骤a中，采用的PB缓冲液为100-150mmol/L的PB缓冲液，采用的MES缓冲液为50-100mmol/L的MES缓冲液。

4.根据权利要求1所述的稳定的补体C4检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述制备胶乳包被的羊抗人C4特异抗体颗粒的过程的步骤b中，采用的PB缓冲液为100-150mmol/L的PB缓冲液。

5.根据权利要求1所述的稳定的补体C4检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述制备胶乳包被的羊抗人C4特异抗体颗粒的过程的步骤c中，采用的MES缓冲液为100-150mmol/L的MES缓冲液。