[发明专利]一种桔小实蝇卵的显微注射方法

权利要求书

1.一种桔小实蝇卵的显微注射方法，其特征在于，包括以下步骤：

(B1)用将放有桔小实蝇卵的黑色纱布固定在离心管的管口，倒扣离心管将桔小实蝇卵在体积浓度1.5-2％的次氯酸钠溶液中浸泡，轻轻晃动离心管使桔小实蝇卵充分接触次氯酸钠溶液；

(B2)将处理过的去壳卵用纯水洗涤，期间轻轻晃动，将次氯酸钠溶液尽量洗涤干净；将处理好的去壳卵挑取到覆盖湿润滤纸的培养皿中；

(B3)先准备好粘着有双面胶的玻片；在解剖镜下将桔小实蝇去壳卵依序横向排序在厚滤纸上，翻转粘着双面胶的玻片，将排列好的桔小实蝇去壳卵转移到双面胶上，用镊子的背部轻轻滑过玻片，从而转移桔小实蝇去壳卵到玻片上，并将去壳卵在干燥剂中干燥8-12min，随后用水饱和油覆盖去壳卵表面，防止进一步干燥；

(B4)进行显微注射，完毕，保留注射过的桔小实蝇去壳卵。

2.根据权利要求1所述的桔小实蝇卵的显微注射方法，其特征在于，还包括(B5)保持覆盖卵的水饱和油充足，将玻片放置在有湿润滤纸的培养皿中，置于桔小实蝇孵化环境中。

3.根据权利要求1所述的桔小实蝇卵的显微注射方法，其特征在于，步骤(B1)中，将桔小实蝇卵在体积浓度1.5-2％的次氯酸钠溶液中浸泡1-2min，轻轻晃动离心管使桔小实蝇卵充分接触次氯酸钠溶液。

4.根据权利要求3所述的桔小实蝇卵的显微注射方法，其特征在于，所述次氯酸钠溶液的体积浓度为1.8％。

5.根据权利要求1所述的桔小实蝇卵的显微注射方法，其特征在于，步骤(B2)中，用纯水洗涤去壳卵5-7次，转移桔小实蝇去壳卵到贴有双面胶的玻片上，将去壳卵在干燥剂中干燥10min。

6.根据权利要求1-5任一项所述的桔小实蝇卵的显微注射方法，其特征在于，所述放有桔小实蝇卵的黑色纱布中的桔小实蝇卵，是通过以下方法采集得到的，所述方法包括以下步骤：

在管壁打孔的离心管中加入橙汁，不断摇晃使橙汁充分接触离心管内壁然后将其放入能产卵的桔小实蝇饲养笼中，放置15-35min，桔小实蝇在离心管产卵，得到产卵管；

取出产卵管，用清水冲洗将离心管内壁的卵收集到黑色纱布上。

7.根据权利要求6所述的桔小实蝇卵的显微注射方法，其特征在于，所述离心管为50ml，加入过滤果肉的橙汁10±1ml。

8.根据权利要求6或7所述的桔小实蝇卵的显微注射方法，其特征在于，放置时间为20-30min。