[发明专利]一种冷处理对马铃薯进行脱毒育苗的方法

说明书

技术领域

本发明涉及蔬菜病毒防治技术领域，具体涉及一种冷处理对马铃薯进行脱毒育苗的方法。

背景技术

马铃薯在生产上利用的是无性繁殖技术，无性繁殖会造成病毒在植物体内逐代积累，多代后表现出生病的病毒，造成大幅度减产，并且感染病薯在贮存期间会发生腐烂，对生产和销售都造成很大的损失，目前尚无特效药能置于马铃薯病毒性病害，生产上解决这一问题最广泛的方法是采用热处理结合茎尖剥离脱毒技术，获得无毒植株后在通过组织培养获得大量无毒苗，在温室或网室内生产出无毒种薯用于生产，然而该方法存在操作技术要求高、费时、成活率和脱毒率都比较低的问题，针对热处理结合茎尖剥离脱毒技术存在的缺点，近几年又新研发出超低温冷冻脱毒技术，超低温冷冻脱毒技术在脱毒率方面表现优异，但超低温冷冻对组织细胞存活率有一定影响，脱毒率虽然提升上来了，但实际扩大生产最终获得脱毒苗的概率却比较低。

发明内容

为解决现有采用热处理结合茎尖剥离脱毒技术以及超低温冷冻处理培养获得种薯无毒苗存在的问题，本发明提供一种冷处理对马铃薯进行脱毒育苗的方法。

本发明的方案如下：一种冷处理对马铃薯进行脱毒育苗的方法，具体的：

（1）剪取茎尖1-2mm，在相对湿度为35-40%，温度为35-38℃的环境下干燥至含水量至65-68wt%；

此处理能够对茎尖适度脱水，提高细胞质浓度，缩小细胞体积，降低低温冷冻对组织细胞存活率的影响，另外含水量在65-68wt%的茎尖还具有极强的再生能力；

（2）将茎尖装入包装袋，抽真空；

（3）将抽真空得到的包装袋送入冷冻室内，冷冻室内温度为-8~-10℃，冷冻室内压力为100-110MPa，冷冻处理10-12分钟；

此处理过程能够实现有效脱毒，-8~-10℃，冷冻室内压力为100-110MPa，冷冻处理10-12分钟的脱毒效果，可与-60℃下脱毒1小时所获得的脱毒效果相媲美，且显著缩短了脱毒时间，提高了脱毒冷冻温度；

（4）将冷冻处理得到的茎尖放于30-32℃的处理液中充分解冻；

所述处理液由100份去离子水，0.3-0.5mg天冬酰胺，1-2mg硝酸钙混合得到；

脱毒后的茎尖在处理液中解冻处理，由100份去离子水，0.3-0.5mg天冬酰胺，1-2mg硝酸钙混合得到的处理液能够维持茎尖细胞渗透压，避免解冻过程茎尖细胞出现失水现象，以最大程度保护茎尖细胞活性；

（5）将充分解冻得到的茎尖转接至促萌发培养基中直至萌发长出4-5cm的幼苗时，移栽至大田，所述促萌发培养基由椰土、膨化麦仁、屎肠球菌菌粉按100:2-3:0.1-0.15的重量比混合得到；

由椰土、膨化麦仁、屎肠球菌菌粉按100:2-3:0.1-0.15的重量比混合得到的促萌发培养基具有促生效果，可显著缩短育苗时间；

（6）将幼苗移栽至种植大田。

优选的，剪取茎尖1-2mm，在相对湿度为35%，温度为38℃的环境下干燥至含水量至68wt%。

优选的，将抽真空得到的包装袋送入冷冻室内，冷冻室内温度为-8℃，冷冻室内压力为100MPa，冷冻处理12分钟。

优选的，所述处理液由100份去离子水，0.5mg天冬酰胺，1.8mg硝酸钙混合得到。

优选的，所述促萌发培养基由椰土、膨化麦仁、屎肠球菌菌粉按100:2:0.15的重量比混合得到。

本发明有益效果在于，

本发明冷处理对马铃薯进行脱毒育苗的方法相较于目前冷处理脱毒，提高了冷处理温度，缩短了冷处理时间，降低冷处理给茎尖带来的物理损伤，且本发明在具体脱毒效率方面表现优异，对马铃薯卷叶病、马铃薯Y病毒、马铃薯S病毒、马铃薯X病毒脱除效果表现优异，病毒脱除率能够达到95.5%以上，且脱毒方式对茎尖萌发成活影响小，脱毒后的茎尖萌发成苗率高达88.1%以上，移栽至大田后，表现出极为优异的生长特性，种植期间病害发生率极低，高产特性明显。

具体实施方式

实施例1、一种冷处理对马铃薯进行脱毒育苗的方法，具体的：

（1）剪取茎尖1-2mm，在相对湿度为35%，温度为35℃的环境下干燥至含水量至65wt%；

（2）将茎尖装入包装袋，抽真空；

（3）将抽真空得到的包装袋送入冷冻室内，冷冻室内温度为-8℃，冷冻室内压力为100MPa，冷冻处理10分钟；

（4）将冷冻处理得到的茎尖放于30℃的处理液中充分解冻；