[发明专利]一种阴道炎多联检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种阴道炎多联检测试剂盒，包括盒体，所述盒体内设有检测卡和样本处理液瓶；所述检测卡包括卡盖和卡体，其特征在于：所述卡体内设有阴道加德纳菌检测试纸条、白色念珠菌检测试纸条和阴道毛滴虫检测试纸条，所述阴道加德纳菌检测试纸条、所述白色念珠菌检测试纸条及所述阴道毛滴虫检测试纸条均设有第一样品垫层和经过样品垫预处理液处理的第二样品垫层。

2.根据权利要求1所述的一种阴道炎多联检测试剂盒，其特征在于:所述样本处理液瓶内的处理溶液为牛血清白蛋白、乙二胺四乙酸、叠氮钠和15-25mM的磷酸盐缓冲液配制而成的pH7.2-7.5处理溶液，且每100mL处理溶液中包含0.5～1％w/v的牛血清白蛋白10～15mL、1.0～2.0％w/v的乙二胺四乙酸3～5mL和0.03～0.05％w/v的叠氮钠1～3mL。

3.根据权利要求1所述的一种阴道炎多联检测试剂盒，其特征在于:所述样品垫预处理液为聚乙烯吡咯烷酮、酪蛋白、海藻糖、曲拉通X-100和15-25mM的Tris缓冲液配制的pH8-8.2的预处理液，且每1000mL预处理液中包含10～20g的聚乙烯吡咯烷酮、0.5～1％w/v的酪蛋白40～50mL、5～8％w/v的海藻糖10～15mL和0.3～0.5％w/v的曲拉通X-1001～2mL。

4.根据权利要求1所述的一种阴道炎多联检测试剂盒，其特征在于:所述阴道加德纳菌检测试纸条、所述白色念珠菌检测试纸条及所述阴道毛滴虫检测试纸条的胶体金层分别涂布有抗阴道加德纳菌单克隆抗体层、抗白色念珠菌单克隆抗体层及抗阴道毛滴虫单克隆抗体层。

5.根据权利要求1所述的一种阴道炎多联检测试剂盒，其特征在于:所述阴道加德纳菌检测试纸条、所述白色念珠菌检测试纸条及所述阴道毛滴虫检测试纸条的硝酸纤维素膜上均设有检测线和质控线，相应检测试纸条的硝酸纤维素膜上的检测线分别为涂布有抗阴道加德纳菌单克隆抗体层、抗白色念珠菌单克隆抗体层及抗阴道毛滴虫单克隆抗体的检测线，相应检测试纸条的硝酸纤维素膜上的质控线为分别涂布有羊抗鼠IgG抗体层的质控线。

6.根据权利要求1所述的一种阴道炎多联检测试剂盒，其特征在于:所述卡体的内部设有阴道加德纳菌检测试纸条限位板、白色念珠菌检测试纸条限位板和阴道毛滴虫检测试纸条限位板，所述限位板上设有试纸条放置标识，所述限位板的两端分别设有固定挡板，所述固定挡板分别位于所述限位板两侧。

7.根据权利要求1所述的一种阴道炎多联检测试剂盒，其特征在于:所述卡盖与所述阴道加德纳菌检测试纸条、所述白色念珠菌检测试纸条及所述阴道毛滴虫检测试纸条相对应的区域分别设有样本加样孔、观测孔和安装标识孔。

8.一种阴道炎多联检测试剂盒的制备方法，其特征在于所述制备方法包括以下步骤：

(1)样本处理液的配制

将0.5～1％w/v的牛血清白蛋白10～15mL、1.0～2.0％w/v的乙二胺四乙酸3～5mL和0.03～0.05％w/v的叠氮钠1～3mL，用15-25mM磷酸盐缓冲液定容至100mL，调pH值为7.2～7.5，分别装入试剂瓶内，得到样品处理液；

(2)样品垫预处理液的配制

将10～20g的聚乙烯吡咯烷酮，0.5～1％w/v的酪蛋白40～50mL，5～8％w/v的海藻糖10～15mL和0.3～0.5％w/v的曲拉通X-1001～2mL用15-25mMTris定容至1L，调pH值为8.0～8.2；

(3)样品垫预处理

将裁切好的玻璃纤维浸泡于所述步骤(2)的样品垫预处理液中，静置5～8分钟取出，经过干燥处理后封存备用；

(4)胶体金垫的制备

4.1抗阴道加德纳菌单克隆抗体胶体金垫的制备

将100mL制得的胶体金，调节pH至8.0～8.5，加入抗阴道加德纳菌单克隆抗体，搅拌10～15min后，加入5～8％w/v的BSA 5～8mL，离心复溶后固相于玻璃纤维，干燥备用；

4.2抗白色念珠菌单克隆抗体胶体金垫的制备

将100mL制得的胶体金，调节pH至8.0～8.5，加入抗白色念珠菌单克隆抗体，搅拌10～15min后，加入5～8％w/v的BSA 5～8mL，离心复溶后固相于玻璃纤维，干燥备用；

4.3抗阴道毛滴虫单克隆抗体胶体金垫的制备

将100mL制得的胶体金，调节pH至8.0～8.5，加入抗阴道毛滴虫单克隆抗体，搅拌10～15min后，加入5～8％w/v的BSA 5～8mL，离心复溶后固相于玻璃纤维，干燥备用；

(5)包被硝酸纤维素膜

5.1分别包被抗阴道加德纳菌单克隆抗体、抗白色念珠菌单克隆抗体和抗阴道毛滴虫单克隆抗体

用pH8.0～8.2的PBS缓冲液分别将抗阴道加德纳菌单克隆抗体稀释至0.2～0.3mg/mL，抗白色念珠菌单克隆抗体稀释至0.4～0.5mg/mL，抗阴道毛滴虫单克隆抗体稀释至0.3～0.4mg/mL，并分别喷于相应的硝酸纤维素膜上，形成抗阴道加德纳菌单克隆抗体检测线、抗白色念珠菌单克隆抗体检测线和抗阴道毛滴虫单克隆抗体检测线；

5.4包被羊抗鼠IgG抗体

用pH8.0～8.2的PBS缓冲液将羊抗鼠IgG抗体稀释至1.4～1.6mg/mL，分别喷于所述步骤5.1相应的硝酸纤维素膜上，形成羊抗鼠IgG抗体质控线；

5.5将上述步骤5.4制得的硝酸纤维素膜置37℃烘箱中干燥1.5～2小时；

(6)检测卡安装好，将所述步骤(1)中样本处理液和安装好的检测卡分别置于盒体内，得到阴道炎多联检测试剂盒。