[发明专利]溴氰虫酰胺及代谢物J9Z38在鱼肉中的检测方法

权利要求书

1.溴氰虫酰胺及代谢物J9Z38在鱼肉中的检测方法，其特征是，包括以下步骤：

(1)提取：称取鱼肉样品2g，置于50mL离心管中，加入提取液即2mL0.1％甲酸水和20mL乙腈，在6000rpm条件下匀浆30s，加入1g无水乙酸钠和2g无水硫酸镁，剧烈摇动30s，在4000rpm条件下离心5min；

(2)净化：移取离心管中提取液10mL置于分液漏斗中，第一次加入30mL净化液正己烷，剧烈摇动1min，静置20min，待分液漏斗中液体分层后，弃去上层净化液，分液漏斗中第二次加入30mL净化液正己烷，剧烈摇动1min，静置20min，待分液漏斗中液体分层后，弃去上层净化液，收集分液漏斗中的提取液于平底烧瓶中，在40℃条件下浓缩干，定容至5mL，过0.22μm有机针式滤器，待测定；

(3)测定：配制0.005、0.01、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0mg/L的溴氰虫酰胺和J9Z38标准溶液，分别进样1μL，获得UPLC-MS/MS的响应值，以浓度-峰面积绘制溴氰虫酰胺标准溶液曲线、J9Z38标准溶液曲线；

(4)设定溴氰虫酰胺及代谢物J9Z38在鱼肉中添加浓度为0.01、0.2和10.0mg/kg，进行添加回收率试验，分别得到溴氰虫酰胺和J9Z38的添加回收率和相对标准偏差RSDs；

(5)采用超高效液相色谱串联质谱仪检出溴氰虫酰胺和J9Z38的最小检出量；

(6)根据溴氰虫酰胺和J9Z38在超高效液相色谱串联质谱仪上的响应情况，以及鱼肉中溴氰虫酰胺和J9Z38按最低添加浓度添加的样品在仪器上响应值均大于仪器的3倍信号噪音比，得出溴氰虫酰胺、J9Z38在鱼肉中的最低检测浓度；

所述超高效液相色谱串联质谱仪的色谱条件是：

色谱柱：Waters acquityBEH C18 1.7μm，2.1×100mm；

流动相：乙腈/0.1％甲酸水溶液＝80/20；

流速：0.2mL/min；

柱温：40℃；

进样量：1μL；

所述超高效液相色谱串联质谱仪的质谱条件是：

离子源：ESI⁺；

定量模式：MRM模式；

毛细管电压：4.0KV；

雾化气流量：3.0L/min；

加热气流量：10.0L/min；

Interface温度：300℃；

DL温度：250℃；

Heat Block温度：400℃；

干燥气流量：10L/min；

溴氰虫酰胺定量离子对：475.10286.00，定性离子对：475.10444.10；

J9Z38定量离子对：456.80188.00；定性离子：456.80299.00。