[发明专利]一种增殖培养基制作工艺

权利要求书

1.一种增殖培养基制作工艺，其特征在于：它采用如下的技术方案：

步骤一：大量元素母液制备：其采用如下的方法步骤：

1)取硝酸钾KNO₃ 190g/L，硝酸铵NH₄NO₃ 165g/L，磷酸二氢钾KH₂PO₄ 17g/L，硫酸镁MgSO₄.7H₂O 37g/L，氯化钙CaCl₂.2H₂O 44g/L；

2)将上述步骤1)的各物质分别置于搅拌杯中，加入蒸馏水彻底溶解，然后混合定容到1L，形成大量元素母液贮备液；

步骤二：微量元素母液制备：其采用如下的方法步骤：

1)取碘化钾KI 0.083g/L，硼酸H₃BO₃ 0.62g/L，硫酸锰MnSO₄.4H₂O 2.23g/L，硫酸锌ZnSO₄.7H₂O 0.86g/L，钼酸钠Na₂MoO₄.2H₂O 0.025g/L，硫酸铜CuSO₄.5H₂O 0.0025g/L，氯化钴CoCl₂ 0.0025g/L；

2)将步骤1)中的各物质分别置于搅拌杯中，加入蒸馏水彻底溶解，然后混合定容到1L，形成微量元素母液贮备液；

步骤三：铁盐母液制备：其采用如下的方法步骤：

1)取乙二胺四乙酸二钠Na₂.EDTA 3.73g/L，硫酸亚铁FeSO₄.7H₂O 2.78g/L；

2)将步骤1)中的各物质分别置于搅拌杯中，加入蒸馏水彻底溶解，然后混合定容到1L，形成铁盐母液贮备液；

步骤四：有机成分母液制备：其采用如下的方法步骤：

1)取肌醇10g/L，甘氨酸0.2g/L，盐酸硫胺素VB1 0.01g/L，盐酸吡哆醇VB6 0.05g/L，烟酸VB5 0.05g/L；

2)将步骤1)中的各物质分别置于搅拌杯中，加入蒸馏水彻底溶解，然后混合定容到1L，形成有机成分母液贮备液；

步骤五：吲哚丁酸植物生长调节物质母液的制备：其采用如下方法步骤：

1)称取吲哚丁酸10mg；

2)将吲哚丁酸用1mL的物质的量浓度为0.1mol/L的HCL溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后定容至100mL，得质量浓度为0.1mg/mL的吲哚丁酸植物生长调节物质母液；

或α-萘乙酸植物生长调节物质母液的制备：其采用如下方法步骤：

1)称取α-萘乙酸10mg；

2)将α-萘乙酸用少量75％酒精溶液溶解，最后定容至100mL，得质量浓度为0.1mg/mL的α-萘乙酸植物生长调节物质母液；

步骤六：6-苄基嘌呤植物生长调节物质母液制备：其采用如下的方法步骤：

1)称取6-苄基嘌呤10mg；

2)将6-苄基嘌呤用1mL的物质的量浓度为0.1mol/L的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后定容至100mL，得质量浓度为0.1mg/mL的6-苄基嘌呤植物生长调节物质母液；

步骤七：在烧杯中放入一些蒸馏水，称取7g左右琼脂粉，放在电炉上加热至沸腾，直到琼脂粉溶化；

步骤八：用量筒或移液管，取步骤一中的大量元素母液贮备液1-15ml、步骤二中的微量元素母液贮备液1-15ml、步骤三中的铁盐母液贮备液1-15ml、步骤四中的有机成分母液贮备液1-15ml、步骤五中的吲哚丁酸植物生长调节物质母液0.01-5ml或步骤五中的α-萘乙酸植物生长调节物质母液0.1-5ml、步骤六中6-苄基嘌呤植物生长调节物质母液1-8ml，倒入烧杯中；

步骤九：称取30g蔗糖倒入烧杯中，搅拌溶解，形成混合液；

步骤十：将烧杯中加蒸馏水，然后将混合液定容至1L；

步骤十一：用精密试纸或酸度计测定，用1mol/L的NaOH或1mol/LHCL调整PH至5.7-5.8；

步骤十二：稍微冷却后，分装入培养容器中，无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口，用橡皮筋或绳子扎紧；

步骤十三：上步骤十二中的培养容器，放入消毒灭菌锅灭菌，121℃灭菌20分钟左右；

步骤十四：灭菌后从灭菌锅中取出培养基，在室温下自然冷却后，形成成品培养基。