[发明专利]杂交瘤细胞冻存保种的新方法在审
| 申请号： | 201710654654.X | 申请日： | 2017-08-03 |
| 公开（公告）号： | CN107372463A | 公开（公告）日： | 2017-11-24 |
| 发明（设计）人： | 牛晓旭;李桂林;张文婧;赵巧辉;付光宇;吴学炜 | 申请（专利权）人： | 郑州伊美诺生物技术有限公司 |
| 主分类号： | A01N1/02 | 分类号： | A01N1/02 |
| 代理公司： | 郑州异开专利事务所(普通合伙)41114 | 代理人： | 王霞 |
| 地址： | 450016 河南省郑州市*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 杂交瘤 细胞 保种 新方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种杂交瘤细胞冻存保种的新方法，其特征在于：包括下述步骤：
第一步，将克隆筛选出的分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株扩大培养至对数生长期，然后对杂交瘤细胞进行收集离心，弃上清，保留杂交瘤细胞沉淀；
第二步，取一定量的冻存液对杂交瘤细胞进行细胞重悬并计数，然后再用该冻存液将杂交瘤细胞密度调控至2-5×106个/ml；
第三步，将第二步调控好的杂交瘤细胞悬液按1ml/管分装至冻存管内，密封后竖立放置在百孔盒内，立即放入4℃层析柜中，计时1小时；然后将其转放至-20℃冰柜中，计时1-2小时；继续将其转放至-80℃冷柜中，计时12-24小时；最后将其放置在液氮液面10cm以下，长期保存待用。
2.根据权利要求1所述的杂交瘤细胞冻存保种的新方法，其特征在于：所述第二步用的冻存液由8%DMSO+32%DMEM/RPMI-1640培养基+60%胎牛血清配制而成。
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