[发明专利]基于转座酶建立过表达稳定系的质粒载体及其应用在审
| 申请号： | 201710606285.7 | 申请日： | 2017-07-24 |
| 公开（公告）号： | CN107400679A | 公开（公告）日： | 2017-11-28 |
| 发明（设计）人： | 尹东;胡开顺;陈恒星;李瑜 | 申请（专利权）人： | 中山大学孙逸仙纪念医院 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/62;C12N5/10 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司44245 | 代理人： | 崔红丽,裘晖 |
| 地址： | 510120 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 转座酶 建立 表达 稳定 质粒 载体 及其 应用 | ||
1.基于转座酶建立过表达稳定系的质粒载体，其特征在于：
所述的质粒载体是含有IRDR-L-IRDR-R盒的双链环状质粒，所述IRDR-L-IRDR-R盒包括IRDR-L序列、启动子、标签序列、attR1序列、反向选择性标记基因序列、attR2序列、筛选基因序列和IRDR-R序列；
所述的标签序列为HA标签序列、Myc标签序列、Flag标签序列或V5标签序列。
2.根据权利要求1所述的基于转座酶建立过表达稳定系的质粒载体，其特征在于：
所述的IRDR-L序列为SEQ ID NO.1中自5′端第8877位～9103位碱基的反向互补序列；
所述的IRDR-R序列为SEQ ID NO.1中自5′端第5731位～5958位碱基。
3.根据权利要求1所述的基于转座酶建立过表达稳定系的质粒载体，其特征在于：
所述的启动子为CAG启动子。
4.根据权利要求1所述的基于转座酶建立过表达稳定系的质粒载体，其特征在于：
所述的HA标签序列为SEQ ID NO.1中自5′端第1172位～1201位碱基；
所述的Myc标签序列为SEQ ID NO.2所示；
所述的Flag标签序列为SEQ ID NO.3所示；
所述的V5标签序列为SEQ ID NO.4所示。
5.根据权利要求1所述的基于转座酶建立过表达稳定系的质粒载体，其特征在于：
所述的attR1序列为SEQ ID NO.1中自5′端第1211位～1335位碱基；
所述的attR2序列为SEQ ID NO.1中自5′端第2791位～2915位碱基的反向互补序列。
6.根据权利要求1所述的基于转座酶建立过表达稳定系的质粒载体，其特征在于：
所述的反向选择性标记基因序列是指自杀基因ccdB。
7.根据权利要求1所述的基于转座酶建立过表达稳定系的质粒载体，其特征在于：
所述的筛选基因为抗性与荧光筛选基因，或抗性筛选基因。
8.根据权利要求1所述的基于转座酶建立过表达稳定系的质粒载体，其特征在于：
所述的抗性筛选基因是指嘌呤霉素抗性基因；
所述的荧光筛选基因是指绿色荧光蛋白基因。
9.根据权利要求8所述的基于转座酶建立过表达稳定系的质粒载体，其特征在于：
所述的嘌呤霉素抗性基因的序列为SEQ ID NO.1中自5′端第3464位～4063位碱基；
所述的绿色荧光蛋白基因的序列为SEQ ID NO.1中自5′端第4704位～5438位碱基。
10.权利要求1～9任一项所述的质粒载体在快速构建过表达稳定株中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中山大学孙逸仙纪念医院，未经中山大学孙逸仙纪念医院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201710606285.7/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
