[发明专利]一种促皮肤修复超短肽Purin-WH、其制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种促皮肤修复超短肽Purin‑WH、其制备方法及应用，属于生物医药领域。所述超短肽Purin‑WH为一种直链小肽，其氨基酸结构为：Val‑Val‑Pro‑Thr‑Val‑Val‑Cys‑Pro‑Lys，所述超短肽Purin‑WH可通过自动多肽合成仪合成，并通过HPLC反相柱层析脱盐纯化。本发明中的超短肽Purin‑WH分子量小、结构简单、合成成本极低，并且能够显著加速全皮肤伤口愈合，有效清除活性氧、并可促进皮肤胶原蛋白的生成、有助于皮肤修复；无细胞毒性和溶血性。该超短肽可用于制备用于受损表皮的修复与再生的药物，如治疗烧伤、烫伤、皮肤溃疡等药物，并可一定程度替代EGF在皮肤修复、刺激皮肤胶原蛋白增生的抗衰老、抗氧化美容护肤品领域的运用，并且它的作用可能还不止局限于此。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种促皮肤修复的超短肽Purin-WH、其制备方法及应用。

背景技术

皮肤是覆盖在人体表面最大的器官，易受多种因素的影响(如外界的物理化学因素、自身激素水平变化、机械压力等)。同时，皮肤作为机体与外界的第一道天然屏障，一旦受损，机体就会立即开启生理调节进行皮肤的损伤修复。

皮肤的损伤修复是一个需要多种类型细胞参与的复杂过程，一般包括三个阶段：(1)炎症发生；(2)伤口重新上皮化，新生组织形成；(3)再生的组织结构重塑。这三个阶段之间既彼此交错，又相互区别，是一个连续的生物反应的自我修复过程。同时，活性氧簇作为有氧呼吸过程中不可避免的副产物，对某些细胞和生化过程非常重要，活性氧簇参与伤口愈合过程，氧化应激是伤口愈合过程中的一个重要因素，通常能抑制组织的重构。活性氧类可导致氧化损伤，脂质过氧化，DNA断裂和酶失活，这些会抑制伤口愈合。

人们已经发现，使用抗氧化剂清除自由基可显著促进伤口愈合。另外，真皮成纤维细胞和表皮角质上皮细胞是创伤愈合过程中的主要功能细胞。成纤维细胞在信号的引导下，向伤口迁移，分泌细胞外基质，进行胶原排列，并收缩伤口，促进愈合。现已有研究证实，在皮肤损伤后的修复过程中，胶原蛋白作为细胞外间质的主要成分更是发挥其重要作用。胶原蛋白具有促进细胞迁移，诱导有助于细胞趋化作用的相关因子等表达，与皮肤修复密切相关。

长久以来，皮肤修复一直是临床外科学中常见问题，其中对创面修复的研究以及组织再生修复的机制研究是整个外科学领域范围内目前研究最为突出重要的部分。诸如皮肤缺损，大面积烧伤，以及闭合伤口等相关问题亟待解决。以往的研究发现表皮细胞生长因子(Epidermal Growth Factor，EGF)可以促进上皮再生，加快创伤愈合。hEGF(humanepidermal growth factor，hEGF)是再上皮化过程中重要的生长因子，其结构是由53个氨基酸组成，分子量为6045Da，分子内有6个半胱氨酸组成的二硫键，形成3个分子内环型结构，组成生物活性所必须的受体结合区域。hEGF在广泛应用的同时，人们越来越关注的问题是如何兼顾高产量、高活性前提下，还能够保证商品化生产的价值与应用。已知最初获得EGF的传统方法是从动物的尿液中分离提取的，经过12道程序，消耗3000L人的尿液，但得率却非常低。而唾液、泪液、母乳和血浆等含有EGF的体液中提取EGF，产量也极低。每克售价近200万美元，大大限制了EGF在美容领域的应用。若采用化学合成，注意到hEGF包含3对二硫键，将对合成效率造成极大困难，且产量及活性均无法达到令人满意。而生物合成的手段将更无法直接保证产量和蛋白修饰的准确性。因此，序列短小、合成简单、活性高效的促皮肤修复的超短肽必将越来越受到人们的关注，其在皮肤修复、再生医疗、美容等领域的开发潜力亦是不容小觑。

活性生物肽主要意义在于它们能够参与生物体内蛋白质的合成代谢和分解代谢，促进生物体内相关细胞的有丝分裂与增殖分化，并且主动调节细胞内外蛋白质的合成与分泌。尤其是一些小分子的超短肽，一级序列全长小于10个氨基酸、分子量小，在具备高安全性、利于皮肤高效吸收的同时，更明显的优势在于其合成制备的方法简便、产量高且纯度高，较之EGF更为经济，更利于超短肽商品化的投入与生产。可见，促皮肤修复肽在再生美容护肤品、创面愈合医疗药品等领域均具有十分诱人的应用前景和开发潜质。