[发明专利]一种测定甲胎蛋白的电化学免疫传感器及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种测定甲胎蛋白的电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于，基底电极由MWNTs-CS溶液修饰，戊二醛溶液结合到经MWNTs-CS修饰的电极上，甲胎蛋白第一抗体溶液通过酰胺键共价结合到结合戊二醛的基底电极上，甲胎蛋白抗原溶液特异性结合到甲胎蛋白第一抗体上，CdTe@SiO₂-GO-甲胎蛋白第二抗体溶液特异性结合到甲胎蛋白抗原上。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述基底电极为玻碳电极。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述MWNTs-CS溶液按如下步骤制备：将CS分散在乙酸水溶液中并搅拌0.2～3h，得到CS溶液；将MWNTs分散在CS溶液中并超声处理10～60min以获得MWNTs-CS的均匀混合物；离心得到MWNTs-CS沉淀，并重悬于水中制成MWNTs-CS溶液。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，CdTe@SiO₂-GO-甲胎蛋白第二抗体溶液按如下方法制备：

(1)量取环己烷、Triton X-100、正己醇，混合均匀后加入CdTe水溶液，混合均匀后加入TEOS和APTES，混合均匀后加入氨水，1～10℃搅拌反应12～36h，反应结束后离心，用乙醇和水清洗沉淀，最后重悬于水中得到CdTe@SiO₂溶液；

(2)用EDC溶液和NHS溶液将GO悬浮液室温活化1～5h，离心获得沉淀；将沉淀加入步骤(1)得到的CdTe@SiO₂溶液中，室温搅拌反应1～5h，离心清洗沉淀，最后重悬于水中得到CdTe@SiO₂-GO溶液；

(3)将甲胎蛋白第二抗体溶液加入步骤(2)得到的CdTe@SiO₂-GO溶液中，黑暗条件下1～10℃搅拌反应6～18h，然后加入BSA溶液室温搅拌反应1～5h，离心并重悬于PBS溶液中得到CdTe@SiO₂-GO-甲胎蛋白第二抗体溶液。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)CdTe、TEOS和APTES的比例为50mg:1mL:1mL～70mg:1mL:1mL，TEOS和氨水的体积比为1:1～1:3。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中EDC、NHS和GO的质量比为4:2:1～2:1:2。

7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中CdTe和步骤(2)中GO的质量比为3:1～3:5。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将基底电极进行打磨、抛光和超声清洗；

(2)取MWNTs-CS溶液，滴加到步骤(1)预处理过的电极表面，室温放置2h，用PBS溶液清洗，晾干；

(3)向步骤(2)得到的电极表面滴加戊二醛溶液，室温放置1～5h，然后用PBS溶液清洗，晾干；将甲胎蛋白第一抗体溶液滴加到电极表面，1～10℃放置12h，然后用PBS溶液清洗，晾干；

(4)向步骤(3)得到的电极表面滴加BSA溶液，室温放置1～5h，然后用PBS溶液清洗，晾干；

(5)向步骤(4)得到的电极表面滴加甲胎蛋白抗原溶液进行特异性反应，20～50℃反应10～60min，然后用PBS溶液清洗，晾干；

(6)向步骤(5)得到的电极表面滴加CdTe@SiO₂-GO-甲胎蛋白第二抗体溶液进行特异性反应，20～50℃反应10～60min，然后用PBS溶液清洗，晾干。

9.权利要求1-8任意一项所述的制备方法制备得到的电化学免疫传感器。