[发明专利]一种减轻水蛭出血不良反应的水蛭肽制备工艺

说明书

技术领域

本发明属于医药及生物技术领域，具体涉及一种减轻水蛭出血不良反应的水蛭肽制备工艺，尤其是一种减轻水蛭出血不良反应并且具有防治动脉粥样硬化作用的水蛭肽制备工艺。

背景技术

动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)是一种脂类代谢缺陷疾病，其特征是脂质和纤维类物质在大中型弹性血管中积累，由于血管堵塞可能会导致心脏、大脑或四肢缺血，导致梗塞。因此AS也被认为是众多心脑血管疾病发病的主要原因，包括心肌梗死、冠心病及脑血栓等。准确的说，AS的病变代表了一系列高度特异性的细胞和分子反应，它是血管受损后发生的一种慢性炎症过程，而炎症反应也贯穿于动脉粥样硬化发生和发展的整个过程。事实上，AS的早期病变脂肪纹的形成常见于婴幼儿，它只是一种纯粹的由单核细胞源的巨噬细胞和淋巴细胞组成的炎症病变，不具有临床意义，但是它是脂质坏死碎片和平滑肌细胞(Smooth Muscle Cells，SMCs)积累形成晚期病变的先兆特征，由此可见AS的发生是一个缓慢的过程。

血管内皮是心血管系统中的连续细胞内膜，它是血液的天然容器，是调节心血管系统稳态网络中的关键调节位点。AS病变形成的最早变化发生在内皮中，也被称作是内皮功能紊乱(Endothelial cell dysfunction，ECD)，这些变化包括内皮细胞在NO，前列环素，血小板衍生生长因子(Platelet derived growth factor，PDGF)，血管紧张素和内皮素的介导下对脂蛋白和其他血浆成分的渗透性增加，使包括L-选择素、整合素、血小板-内皮细胞粘附分子-1(Platelet endothelial cell adhesion molecule-1，PECAM-1)在内的白细胞粘附分子以及包括E-选择素、P-选择素、ICAM-1和VCAM-1在内的内皮粘附分子上调，使血液循环中的单核细胞进入内膜，分化成巨噬细胞后吞噬ox-LDL形成泡沫细胞；活化的内皮细胞和巨噬细胞产生多种趋化因子和生长因子作用于SMCs诱导其增殖并在内膜内合成细胞外基质从而产生纤维斑块。发展中的斑块进行结构重建形成一个覆盖ox-LDL、胆固醇晶体和细胞碎片组成的坏死核心的纤维帽。这些复杂斑块的外侧边缘有丰富的炎性细胞群，可以进一步调节内皮的促炎表型并通过对细胞外基质的蛋白水解修饰形成不稳定斑块。不稳定的斑块可能会释放与血栓形成密切相关的内容物，引发动脉粥样硬化血栓栓塞。

目前治疗动脉粥样硬化的药物包括他汀类药物、细胞因子抑制剂和一些天然产物。在大多数双子叶植物中存在的大量环戊二烯单萜类化合物，被广泛研究，在体内和体外模型的大量研究中证明了含有环烯醚萜草本植物的不同抗炎活性，特别是在夹竹桃科、唇形科、茜草科、马钱科、玄参科和马鞭草科的植物中。另外大蒜、红倍酚、亚麻籽及其中的亚麻木酚素(Secoisolariciresinol Diglucoside，SDG)和亚麻木脂素复合物(Flax lignan complex，FLC)、白藜芦醇等都可以不同程度抑制高胆固醇血症AS。

水蛭是我国传统的中药材，它具有破血、逐淤等功能，其煎剂、口服液等剂型广泛用于心血管疾病的防治。但是其不良反应也时有发生，其中出血不良反应最为突出，严重影响其患者的健康。中医上常用水蛭粉和水蛭煎剂治疗多种疾病，但是这类水蛭制剂常伴有多种不良反应，如：出血、呕吐、腹泻等。单味水蛭也可以引起消化系统不良反应，包括胃肠道不适、恶心、呕吐等。还有报道称在中药水蛭粉碎过程中，工作人员因长时间吸入水蛭粉尘可导致咳血、鼻腔出血和喉咙干燥等不良反应。另有患有脑梗塞、及糖尿病患者在服用以水蛭为主要成分的活血通络胶囊5个月后，导致眼球结膜下出血，经停用后症状有明显缓解。临床上应用水蛭粉进行疾病的治疗时，水蛭粉服用过量或者服用过长时间都可能导致出血不良反应，水蛭制剂不能长时间应用的主要原因也是因为容易造成出血反应(内出血)。临床上应用水蛭粉服用时间不超过2个月，而且要在服用期间定期监测血凝调整用药量。

发明内容

为解决上述问题，本发明通过实验获得一种既不影响内皮细胞中凝血相关因子mRNA的表达，又能够抑制动脉粥样硬化发展的水蛭提取物的制备方法，从而找到一种临床可长期用于动脉粥样硬化的预防，安全可靠的，出血不良反应弱的新型水蛭口服制剂。

本发明的目的之一提供一种既能减少出血不良反应(不影响内皮细胞中凝血相关因子mRNA的表达)，又能够抑制动脉粥样硬化发展的水蛭提取物的制备方法。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：