[发明专利]一种减轻水蛭出血不良反应的水蛭肽制备工艺

权利要求书

1.一种减少出血不良反应、抑制动脉粥样硬化发展的水蛭提取物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

将水蛭干体粉碎匀浆后，36-38℃、pH2.0，加入胃蛋白酶10000NFU/g，酶解8h及以上；将酶解液进行醇沉，取滤液浓缩冻干获得水蛭提取物。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，匀浆前先进行浸泡，优选的，加入20倍的超纯水4℃浸泡48小时。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，匀浆操作在冰浴条件下进行且为高速匀浆，具体的，高速匀浆转速为18000r/min，时间为30min。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，醇沉过程为向酶解液中加入95％的乙醇，使得乙醇的体积分数为75％，4℃静置醇沉12h。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，醇沉后，将醇沉的提取物进行抽滤，离心得上清，然后在37℃下减压浓缩至总体积的二十分之一，冻干得到获得水蛭提取物。

6.一种减少出血不良反应、抑制动脉粥样硬化的水蛭提取物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

(1)水蛭干体经过粉碎机粉碎成粉；

(2)将水蛭粉入到烧杯中，并加入20倍的超纯水4℃浸泡48小时；

(3)浸泡好的水蛭粉在冰浴条件下进行高速匀浆，转速为18000r/min，时间为30min；

(4)匀浆液预热至37℃，调节pH为2.0，加入胃蛋白酶10000NFU/g，37℃酶解8h，每小时调节一次pH值；

(5)酶解完成后，向酶解液中加入95％的乙醇，使得乙醇的体积分数为75％，4℃静置醇沉12h；

(6)将醇沉的提取物进行抽滤，离心得上清，然后在37℃下减压浓缩至总体积的二十分之一，冻干得到水蛭提取物，-40℃保存。

7.权利要求1-6任一项制备方法制备得到的水蛭提取物。

8.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含权利要求7所述的水蛭提取物；优选的，所述药物组合物还包括药用辅料；更优选的，药用辅料为固态或液态，固态形式的制剂包括粉剂、片剂、分散颗粒、胶囊、药丸及栓剂；其中优选，粉剂及片剂可包含约5％至约95％的活性成分；固体辅料选自碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、糖或者乳糖；

液态形式的制剂包括溶液、悬浮液及乳液，优选的，液态选自非经肠注射用水溶液或水-丙二醇溶液，或添加甜味剂及造影剂的口服溶液。

9.权利要求7所述的水蛭提取物在制备抑制动脉粥样硬化的药物中的用途，所述用途中水蛭提取物能减少出血不良反应。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，权利要求7所述水蛭提取物与至少一种其它心血管疾病药物药物合用，优选的，其它心血管疾病药物包括具有抗血栓形成、抗血小板聚集、抗动脉粥样硬化、抗再狭窄症及/或抗凝血、血管舒张活性的药物。