[发明专利]单克隆抗体配对检测方法及其应用、检测装置在审
| 申请号: | 201710453589.4 | 申请日: | 2017-06-15 |
| 公开(公告)号: | CN107478840A | 公开(公告)日: | 2017-12-15 |
| 发明(设计)人: | 白书红;刘文婷 | 申请(专利权)人: | 普菲特益斯生物科技(北京)有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/577 |
| 代理公司: | 深圳市中原力和专利商标事务所(普通合伙)44289 | 代理人: | 王诗捷 |
| 地址: | 101111 北京市大兴区亦庄*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 单克隆抗体 配对 检测 方法 及其 应用 装置 | ||
1.一种单克隆抗体配对检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤S1:将具有多个抗原决定簇的完全抗原免疫Balb/c小鼠,获得多株稳定细胞株,从而制备得到不同的阳性单克隆抗体;
步骤S2:将每株单克隆抗体和羊抗鼠IgG分别包被在NC膜上,作为检测线和质控线,NC膜两端分别贴样品垫和吸水纸,制作形成胶体金条;
步骤S3:将每株单克隆抗体分别进行胶体金标记;
步骤S4:以两两交叉的方式将胶体金标记的抗体直接滴加在包被单克隆抗体的胶体金条的样品垫上,再将待检测样品滴加在样品垫上,同时做空白对照,反应后选取质控线出线,阳性样品检测线出线,而空白对照检测线不出线的单克隆抗体对作为配对单抗。
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体配对检测方法,其特征在于,步骤S4中,反应10min后进行检测结果判断。
3.根据权利要求1所述的单克隆抗体配对检测方法,其特征在于,所述胶体金条宽度为4mm。
4.根据权利要求1所述的单克隆抗体配对检测方法,其特征在于,步骤S1具体包括如下步骤:
将具有多个抗原决定簇的完全抗原免疫Balb/c小鼠,并将免疫Balb/c小鼠能分泌特异性抗体的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,筛选出阳性杂交瘤细胞株;
对所述阳性杂交瘤细胞株进行有限稀释克隆化培养、定株扩大培养;
将定株扩大培养后的阳性杂交瘤细胞株分别注射进已经致敏的Balb/c小鼠腹腔,并采集腹水进行纯化,得到由不同阳性单克隆抗体杂交瘤细胞株分泌的特异性抗体。
5.一种如权利要求1-4中任一项所述的单克隆抗体配对检测方法在检测人类粪便中幽门螺杆菌的应用。
6.一种单克隆抗体配对检测装置,其特征在于,包括PVC底板、形成于所述PVC底板的NC膜、形成于所述NC膜上且间隔设置的检测线和质控线、固定于所述PVC板且分别贴设于所述NC膜两端的样品垫和吸水纸,所述检测线由单克隆抗体包被于所述NC膜上形成,所述质控线由羊抗鼠IgG包被于所述NC膜上形成。
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