[发明专利]胃膜素和胃蛋白酶的联合提取方法有效
| 申请号： | 201710438060.5 | 申请日： | 2017-06-12 |
| 公开（公告）号： | CN107299094B | 公开（公告）日： | 2020-09-29 |
| 发明（设计）人： | 龚征强;叶长蓉 | 申请（专利权）人： | 四川菲德力制药有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/64 | 分类号： | C12N9/64;C07K14/47;C07K1/14 |
| 代理公司： | 成都正华专利代理事务所(普通合伙) 51229 | 代理人： | 李林合 |
| 地址： | 610031 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 胃膜素 胃蛋白酶 联合 提取 方法 | ||
1.一种胃膜素和胃蛋白酶的联合提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)以料液比为1:1.55～1.65的比例，向猪胃黏膜中加入体积分数为4％～6％的盐酸溶液，再加入50％～60％猪胃黏膜重量的苯甲酸钠，40～45℃浸泡1～2h，过滤，收集滤液；
(2)向滤液中加入碱性脂肪酶，于32～35℃，pH值为9.0～9.2的条件下酶解0.5～1.5h，继续加入中性脂肪酶，于32～35℃，pH值为7.0的条件下酶解0.5～1.5h，再将其浓缩为原滤液体积的1/3～1/2，冷却至0～5℃；其中，碱性脂肪酶和中性脂肪酶与滤液的重量体积比均为0.02～0.05:1；
(3)调节上述浓缩液pH值为3.0～6.0，再缓慢加入等体积的0～5℃的丙酮，并在添加过程中迅速搅拌，静置16～20h，过滤，分别收集胃膜素粗品和上清液，向胃膜素粗品中加入0～5℃的95％乙醇，洗涤2～3次，分离胃膜素和洗涤液，于70～80℃真空干燥胃膜素，得胃膜素精品；
(4)将步骤(3)中所述洗涤液与上清液合并，在快速搅拌过程中，缓慢加入1.5～2倍混合液体积的混合盐溶液，调节溶液pH值为4.0～5.0，静置20～28h，离心，再用90％乙醇洗涤沉淀物2～3次，得胃蛋白酶；所述混合盐溶液包括硫酸铵溶液和氯化钠溶液，两者体积比为2～3:7～11。
2.根据权利要求1所述的胃膜素和胃蛋白酶的联合提取方法，其特征在于，步骤(1)中所述料液比为1:1.61。
3.根据权利要求1所述的胃膜素和胃蛋白酶的联合提取方法，其特征在于，步骤(1)中所述盐酸体积分数为5.4％。
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