[发明专利]一种可工厂化生产牛樟芝的培育方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种可工厂化生产牛樟芝的培育方法。

背景技术

牛樟芝(Antrodia campho rata)是一种新发现的药用真菌，素有“药中之王”“森林中的红宝石”的美誉，隶属担子菌亚门，层菌纲，非褶菌目，多孔菌科，薄孔菌属，是一种珍稀药用真菌。研究表明药用真菌具有抗肿瘤，降血压和提高免疫力等作用，与西药相比药用真菌具有无副作用，不易产生抗性，药效持久等优点，牛樟芝，作为药中之王，其多糖和三帖类物质特别多，特别对肝癌患者有显著功效，其三帖类物质达到五十多种，还有二萜，等能够抑制癌细胞保肝，调节免疫力，抑制血管新生，抗炎症，降血糖，抗疲劳，抗氧化等功效。

野生牛樟芝生长在台湾干枯的一种珍稀树种牛樟树上，野生牛樟树对条件要求比较苛刻，生长缓慢，在内陆几乎不适合生长，并且台湾牛樟树资源短缺，并且最重要的是野生牛樟芝生长缓慢，无法满足社会需求。并且人工培育牛樟芝尚未成熟，特别是工厂化生产牛樟芝关键技术亟待解决。

牛樟芝固体菌种生长速度很慢，要想实现牛樟芝工厂化生产，首先要解决牛樟芝大规模深层液体发酵技术，以牛樟芝菌丝体和三萜产量为目标，通过单因素实验优化了牛樟芝摇瓶培养条件，优化出了液体发酵最佳碳源，氮源，最佳培养条件。在摇瓶基础上进行大型发酵罐扩大培养，并要对通气量，接种量，和培养温度对樟芝菌丝产量和活性的影响。

目前牛樟芝液体发酵都是小规模的摇瓶发酵工艺，大规模的发酵罐工艺并不成熟。而我们经过长期研究突破了牛樟芝液体发酵罐大规模深层发酵技术，并且实验出了一组栽培料数据，能够生产处含较高多糖及三萜等物质的牛樟芝产品。

发明内容

人工大规模生产牛樟芝需要优化出牛樟芝固体培养基，液体培养基，袋料培养基最佳配方，以及液体深层发酵技术和袋料栽培技术使人工栽培的牛樟芝和野生牛樟芝成分相似。为解决现有技术中存在的问题，本发明提供一种可工厂化生产牛樟芝的培育方法。采用本发明的培育方法可快速并且低成本生产出成分和野生牛樟芝相似的产品，使牛樟芝能够走入寻常百姓家中，更大满足人类的需求。

本发明提供的技术方案如下：

一种可工厂化生产牛樟芝的培育方法，包括以下步骤：

(1)牛樟芝菌种的活化接种：将牛樟芝菌种接种到固体培养基表面，然后放入温度20-30℃，湿度35-45％的无光环境中培养8-12天待用；

(2)摇瓶发酵：将步骤(1)中培养好的菌种接种到摇瓶液体培养基中，放入温度20-30℃，湿度35-45％的无光环境静止培养2-4天，然后进行搅拌培养8-10天待用；

(3)深层液体发酵：将步骤(2)培养好的菌种接种到发酵罐培养基中进行培养，温度20-30℃，培养发酵7-9天；

(4)固体袋料栽培：将步骤(3)培养好菌种接种到固体栽培料袋中，放入温度25-30℃，湿度35-45％的无光环境中培养3个月；调节温度成18-22℃、湿度48-52％将袋子脱掉，给予一定的散射光，继续培养2个月，当培养至料表面70-80％成红色时即可。

作为优选，所述固体培养基的配方为土豆200g、葡萄糖20g、蛋白胨2g、酵母膏3g、硫酸镁0.5g、磷酸二氢钾1.0g、维生素B1 50mg、琼脂粉16g、水定容至1L。

作为优选，所述摇瓶液体培养基的配方为：土豆200g、葡萄糖20g、蛋白胨2g、酵母膏3g、硫酸镁0.5g、磷酸二氢钾1.0g、维生素B1 50mg、琼脂粉0.5g、水定容至1L。

作为优选，所述发酵罐培养基为：土豆100g、葡萄糖20g、蛋白胨2g、酵母膏3g、硫酸镁0.5g、磷酸二氢钾1.0g、维生素B1 50mg、琼脂粉0.5g、水定容至1L。

作为优选，所述固体料袋配方：小麦94.75％、黄豆粉3％、石膏1％、白糖1％和石灰0.25％。

本发明所述的培育方法中，进一步优选的技术方案为：

所述步骤(1)、(2)中温度25℃，湿度40％；步骤(3)中稳定25℃。

所述步骤(4)中优选放入温度25℃，湿度40％的无光环境中培养3个月，调节温度成20℃、湿度50％将袋子脱掉，给予一定的散射光，继续培养2个月，当培养至料表面70-80％成红色时即可。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

(1)本发明优选出了牛樟芝固体培养基，液体培养基(摇瓶发酵、深层液体发酵)，袋料培养基的最佳配方，采用本发明的上述培养基可缩短菌种萌发速度，提高菌丝生长速度。