[发明专利]基于拉曼光谱的L-精氨酸-α-酮戊二酸的在线浓度检测方法

说明书

本发明公开了基于拉曼光谱法的L‐精氨酸‐α‐酮戊二酸溶液的在线浓度测定方法。该方法包括以下步骤：1)设定拉曼光谱仪预设参数；2)测定纯溶剂的拉曼光谱并设为测量背景；3)测定待测样品的拉曼光谱，并对光谱数据进行预处理；4)判断在990～1030cm^‐1波数范围内是否有拉曼峰，若没有，则待测液中不含L‐精氨酸‐α‐酮戊二酸；若存在拉曼峰，进而判断850～870cm^‐1波数范围内是否有拉曼峰，若没有，则待测液中含有L‐精氨酸‐α‐酮戊二酸；5)分别通过外标法建立拉曼峰响应值与浓度的关联式，分析溶液中L‐精氨酸‐α‐酮戊二酸的含量。本发明检测时间短，操作简单便捷，可实现对待测各组分的实时分析。

技术领域

本发明涉及一种L-精氨酸-α-酮戊二酸的检测方法，具体是采用一种基于拉曼光谱的在线检测方法实时测定L-精氨酸-α-酮戊二酸的溶液浓度。

背景技术

L-精氨酸-α-酮戊二酸盐(L-Arginine-α-Ketoglutaric acid，简称AAKG)是一种广泛用作运动营养剂的氨基酸保健品。AAKG能在一定程度增进体内氧输送，提高肌肉力量和持久力；AAKG还能直接快速地向肝细胞提供营养，有助于维护肝功能、改善肝病患者预后质量。

AAKG可由L-精氨酸(Arg)与α-酮戊二酸(AKG)在溶液体系中反应获得。根据反应物Arg和AKG的摩尔比，AAKG存在摩尔比为1的单精氨酸盐(AAKG-1)和摩尔比为2的双精氨酸盐(AAKG-2)两种形式。

为精确调控AAKG生产时的产品质量，需要准确分析AAKG溶液反应体系中各组分的浓度。中国发明专利201010192571.1公开了一种基于高效液相色谱的AAKG分析方法，在特定流动相条件下，AAKG离解为Arg和AKG，由此可通过外标法测定Arg和AKG浓度，进而关联AAKG的组成含量。然而在AAKG连续生产的实时分析中，反应物Arg、AKG与产物AAKG共存于动态变化的化学反应平衡中，现有的高效液相色谱法无法区分所测得的溶液中Arg和AKG是反应物还是AAKG的离解组分；而且高效液相色谱法需要30分钟以上的较长分析时间，这难以满足实时过程质量控制需要。目前尚未见有溶液反应体系的AAKG实时分析方法报道。

发明内容

本发明目的在于提供一种基于拉曼光谱的AAKG溶液浓度快速分析方法，通过AAKG-1和AAKG-2的拉曼光谱特征差异，识别AAKG溶液组成；进而分析关联溶液中的AAKG浓度。

本发明目的通过如下技术方案实现：

基于拉曼光谱法的L-精氨酸-α-酮戊二酸溶液的在线浓度测定方法，包括如下步骤：

(1)设定拉曼光谱仪预设参数；

(2)以纯溶剂的拉曼光谱测定结果为背景，测定待测样品相对于背景的拉曼光谱；

(3)对步骤(2)所得待测样品的拉曼光谱进行预处理后，若在990～1030cm^-1处存在拉曼峰，可由此判定溶液中存在L-精氨酸-α-酮戊二酸；进而分析谱图中850～870cm^-1位置，若该处不存在拉曼峰，表明待测溶液含有精氨酸与酮戊二酸摩尔比为1:1的L-精氨酸-α-酮戊二酸，称为AAKG-1，反之若该处存在拉曼峰，则表明待测溶液含有精氨酸与酮戊二酸摩尔比为2:1的L-精氨酸-α-酮戊二酸，称为AAKG-2；

(4)若步骤(3)分析表明待测溶液含有AAKG-1，选定990～1030cm^-1处的拉曼光强为特征响应，通过外标法关联待测溶液中的AAKG-1浓度；

(5)若步骤(3)分析表明待测溶液含有AAKG-2，选定850～870cm^-1处的拉曼光强为特征响应，通过外标法关联待测溶液中的AAKG-2浓度。