[发明专利]一种CA15‑3半定量检测试剂盒及制备工艺

权利要求书

1.一种CA15-3半定量检测试剂盒，包括检测板、缓冲液和吸管三个部分，所述检测板包括试纸条和塑料模具，所述试纸条是在塑料模具底板依次粘贴包被膜、吸水垫、标记垫、样品垫组装而成，其特征在于，所述包被膜上包被有羊抗鼠IgG、羊抗兔IgG和CA15-3单克隆抗体2，从靠近吸水垫的一端到靠近标记垫的一端依次为质控线、参照线和检测线；所述标记垫上包被有CA15-3单克隆抗体1、兔IgG和鼠IgG。

2.一种权利要求1所述的CA15-3半定量检测试剂盒的制备工艺，其特征在于，采用双抗夹心法免疫层析诊断技术，包括以下步骤：

(1)包被膜的制备：配制0.015M，pH 7.4±0.1的磷酸盐缓冲液作为包被缓冲液；用包被缓冲液将CA15-3单克隆抗体2稀释至0.5mg/ml，羊抗兔IgG稀释至0.1mg/ml，羊抗鼠IgG稀释至1.0mg/ml，使用连续点膜机以1.0μl/ml的喷量将其以5mm的间隔均匀喷印于硝酸纤维素膜上，将其烘置于37℃烘箱内烘干，然后加入干燥剂，铝箔袋内封存备用；

(2)标记垫的制备：利用柠檬酸钠还原氯金酸分别制备粒径为20～40nm的CA15-3单克隆抗体1、兔IgG和鼠IgG的胶体金溶液，将制备好的胶体金溶液稀释至OD＝30，利用划膜喷金标机以2.0μl/ml的喷量将其以8mm的间隔均匀喷印于聚酯纤维素膜上，将其烘置于37℃烘箱内烘干，然后加入干燥剂铝箔袋封存备用；

(3)样品垫的制备：配制含有1-1.5％三羟甲基氨基甲烷、0.05-1％聚乙烯吡咯烷酮、0.05-1％表面活性剂S9、1-5％鼠抗人红细胞单克隆抗体以及0.05-0.1％酪蛋白的pH为8.0±0.5的纯化水溶液作为样品垫处理液；将样品处理液均匀喷洒在样品垫上，取出后37℃烘箱内烘干；

(4)试纸条的组装及切割：将塑料底板、包被膜、吸水垫、标记垫和样品垫按顺序依次粘贴后，用切条机将其切成试纸条，装入模具中；

(5)缓冲液的配制：配制含有0.01-0.1M磷酸氢二钠及0.01-0.2M氯化钠，pH为7.4±0.1的纯化水溶液。

3.根据权利要求2所述的CA15-3半定量检测试剂盒的制备工艺，其特征在于，所述制备工艺步骤(1)中的硝酸纤维素膜的尺寸为25mm×310mm。

4.根据权利要求2所述的CA15-3半定量检测试剂盒的制备工艺，其特征在于，所述制备工艺步骤(2)中的聚酯纤维素膜的尺寸为10mm×310mm。