[发明专利]一种区分不同海参品种的分析鉴定方法

说明书

技术领域

本发明涉及的是海参的品种鉴定技术领域，具体的说是一种区分不同海参品种的分析鉴定方法。

背景技术

海参一直是广受人们推崇的海洋珍品，名列海味八珍之首。刺参是目前我国唯一规模化养殖的海参品种。但近年来刺参的养殖相继出现了生长缓慢、死亡率升高、病害频发等一系列问题，刺参种质显著下降，于是，海参的国外引种及相关养殖非常热门，如从日本、俄罗斯等国家引进了红海参，从加拿大、美国引进了加利福尼亚海参等，以期提高海参种质资源的遗传多样性，满足目前日益增长的市场需求及急剧下降的野生资源危机，增加国内海参养殖品种的多样性。如何区分不同的海参品种问题迫在眉睫。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的缺陷和不足，提供了一种区分不同海参品种的分析鉴定方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种区分不同海参品种的分析鉴定方法，步骤是：

一、显微镜骨片鉴定方法是：

(1)将采集的海参个体，用无水乙醇固定；

(2)从海参背脊中部，切取1cmZ X 1mm的体壁组织，作为分析样品；

(3)每个样品3个重复，双蒸水洗净，用灭菌吸水纸吸干水分，至于5ml小烧杯中(每个样品配有单独的烧杯和吸管，防止相互污染)；

(4)滴加1ml 100o NaClO溶液消化30s；

(5)挑出未消化的组织块，滴加3ml双蒸水，待组织块完全消融沉淀；

(6)吸去上层溶液，滴加双蒸水，重复漂洗3次；

(7)通过显微镜观察；

二、扫描电镜的制样方法是：

(1)在显微镜下吸取骨片悬液，小心滴加在滤纸上；

(2)用65℃的温度进行烘干4h；

(3)轻柔抖动滤纸，使骨片散落至胶膜上；

(4)HITACHIE-1010型离子溅射仪喷镀金膜；

(5)用HITACHI S-3400N扫描电镜观察并摄影。

本发明的有益效果为：除了从外形、棘刺和凸起等特征方面来区分外，采用了显微镜骨片差异辅助扫描电镜的方法进行鉴定。在显微镜下，可以发现不同形状的骨片，骨片是随海参胚胎发育而逐渐完善稳定的重要特征，形状、大小随种类的不同而差别很大，骨片是进行海参分类及快速鉴别的重要依据。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施方式，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施方式仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例：

一种区分不同海参品种的分析鉴定方法，步骤是：

一、显微镜骨片鉴定方法是：

(1)将采集的海参个体，用无水乙醇固定；

(2)从海参背脊中部，切取1cmZ X 1mm的体壁组织，作为分析样品；

(3)每个样品3个重复，双蒸水洗净，用灭菌吸水纸吸干水分，至于5ml小烧杯中(每个样品配有单独的烧杯和吸管，防止相互污染)；

(4)滴加1ml 100o NaClO溶液消化30s；

(5)挑出未消化的组织块，滴加3ml双蒸水，待组织块完全消融沉淀；

(6)吸去上层溶液，滴加双蒸水，重复漂洗3次；

(7)通过显微镜观察。

二、扫描电镜的制样方法是：

(1)在显微镜下吸取骨片悬液，小心滴加在滤纸上；

(2)用65℃的温度进行烘干4h；

(3)轻柔抖动滤纸，使骨片散落至胶膜上；

(4)HITACHIE-1010型离子溅射仪喷镀金膜；

(5)用HITACHI S-3400N扫描电镜观察并摄影。

本具体实施方式除了从外形、棘刺和凸起等特征方面来区分外，采用了显微镜骨片差异辅助扫描电镜的方法进行鉴定。通过在显微镜下，可以发现不同形状的骨片。骨片是随海参胚胎发育而逐渐完善稳定的重要特征，形状、大小随种类的不同而差别很大，骨片是进行海参分类及快速鉴别的重要依据。骨片分析是海参快速鉴定的理想指标。

虽然发现取海参的不同部位，比如背脊部、腹部触手、口部和肛门部组织，其骨片的特征有所不同，但通过取海参相同部位可以有效规避这个问题。