[发明专利]一种检测ADH1B基因和ALDH2基因多态性的引物及其应用

权利要求书

1.TaqMan-MGB探针法检测ADH1B基因和ALDH2基因多态性的引物，其特征在于，包括如下引物和探针：

用于扩增ADH1B基因rs1229984多态性位点的引物：其核苷酸序列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；

用于扩增ALDH2基因rs671多态性位点的引物：其核苷酸序列如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示；

检测ADH1B基因rs1229984位点多态性的TaqMan-MGB探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示；

检测ALDH2基因rs671位点多态性的TaqMan-MGB探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8所示；

其中SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：7在5’末端标记Fam信号，SEQ ID NO：6和SEQ ID NO：8在5’末端标记VIC信号；

其中，引物SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和探针SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6在同一管中共同使用；引物SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4和探针SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8在同一管中共同使用。

2.权利要求1所述TaqMan-MGB探针法检测ADH1B基因和ALDH2基因多态性的引物在检测ADH1B基因和ALDH2基因多态性中的应用。

3.一种TaqMan-MGB探针法检测ADH1B基因和ALDH2基因多态性的试剂盒，其特在于，包括权利要求1所述的引物和探针以及如下试剂：2xPCR反应混合液、阳性标准品。

4.根据权利要求3所述的TaqMan-MGB探针法检测ADH1B基因和ALDH2基因多态性的试剂盒，其特在于，所述2xPCR反应混合液的配方如下：PCR反应缓冲液、Taq DNA聚合酶、Mg²⁺和dNTPs。

5.根据权利要求3所述的TaqMan-MGB探针法检测ADH1B基因和ALDH2基因多态性的试剂盒，其特在于，所述阳性标准品为AA基因型质粒和GG基因型质粒。

6.TaqMan-MGB探针法检测ADH1B基因和ALDH2基因多态性的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)模板的准备：提取待测样品DNA；

(2)实时荧光定量PCR反应：将以步骤(1)提取的DNA为模板、权利要求1所示的引物和探针进行实时荧光定量PCR扩增反应；

(3)结果判读：根据检测到的荧光信号值，在实时荧光定量PCR仪上的“端点基因分型”模式下，根据每个样品点的颜色和对应的基因型，直接判读结果。