[发明专利]一种太平洋牡蛎中性多糖及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种涉及天然产物深加工领域，具体涉及一种太平洋牡蛎中性多糖及其提取方法和应用，

背景技术

牡蛎是世界上第一大养殖贝类，也是我国重要海洋贝类，属牡蛎科，双壳类软体动物，分布于温带和热带各大洋沿岸水域，主要种类有近江牡蛎、太平洋牡蛎、大连湾牡蛎和密鳞牡蛎。太平洋牡蛎具有左右两个贝壳，以韧带和闭壳肌等相连。左壳凹，大而厚，能用来附着他物，壳表面有较多放射肋，清楚可数；右壳较小而平，表面有多层同心环状的鳞片，没有显著的放射肋。

牡蛎是一种具有药用价值的海洋经济贝类动物，根据分析，其肉中除含有丰富的蛋白质外还存在大量糖原结构的多糖，多糖的含量占牡蛎干重的20％-40％左右。牡蛎粗多糖主要有中性和酸性多糖两种。与其他多糖分子一样，牡蛎糖原的结构分为一级结构和高级结构(包括二级、三级、四级结构)。

对于多糖的提取，对于相同原料，采取的提取方法不同，所得到的多糖结构也不同，相同原料的不同部位的多糖也具有不同的结构，因此处理步骤也不尽相同。因此，选择合适的方法至关重要，在尽可能少地破坏糖原原有结构的基础上，得到较高的提取率。

目前，牡蛎多糖的提取方法主要有水提取法、碱提取法及酶解提取方法。

水提取法具有设备及操作简单方便、适用面广等优点，但是操作时间长，效率低，并且需要反复操作，因此能耗较高。水提取法过程大致为：新鲜牡蛎肉准确称取后，清洗后匀浆，然后将装有牡蛎浆的三角瓶放入沸水浴中煮沸1h，冷却过滤，浓缩醇沉。

碱提取方法能从组织中对多糖进行较完全的提取，这基于动物体内，糖多与蛋白结合形成糖蛋白，其共价键遇碱不稳定，从而达到释放多糖的目的；一般用NaOH、KOH等碱溶液作为提取剂，提取率较高，但多糖分子有可能被降解，对多糖的结构和活性有一定的影响。碱提取法过程大致为：将牡蛎肉匀浆，加入30％氢氧化钾，100℃加热1h，冷却至室温后加入95％

乙醇，过滤得沉淀，即牡蛎粗多糖

酶解提取方法采用生物酶提取活性多糖，因为酶的专一性和选择性较强，故此法具有条件温和，不破坏多糖活性，提取的多糖纯度较高等优点，但会提高生产成本，对提取条件要求也较高。酶提法酶一般为胃蛋白酶和胰蛋白酶，酶解后的牡蛎粗多糖采用离子交换层析进一步纯化，可以得到不同的组分。

粗多糖中还含有色素，蛋白质，低聚糖等杂质。常采用活性炭脱色或者H₂O₂脱色，这会造成中性多糖被吸附，氧化等问题。柱层析法是目前较普遍的去掉这些杂质的方法。

总之，以上这些提取和去除杂质的方法存在操作步骤多，产品收率低，操作周期长、引入杂质、活性降低等问题。

发明内容

本发明的一个目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种新的太平洋牡蛎中性多糖的制备方法，包括以下步骤：

(1)将太平洋牡蛎干粉通过丙酮脱脂，干燥后得到脱脂牡蛎粉；

(2)将脱脂牡蛎粉溶于水中，用超声微波萃取仪处理，将处理后的溶液离心，上清液蒸发浓缩，得到牡蛎多糖粗提物；

(3)将牡蛎多糖粗提物加入乙醇-(NH₄)₂SO₄双水相体系进行萃取分离，萃取后的下相为牡蛎中性多糖粗提液；

(4)将牡蛎中性多糖粗提液进行透析，得到牡蛎多糖精提液，浓缩干燥后即可得到牡蛎中性多糖。

作为对上述技术方案的进一步改进，其中步骤(2)中超声微波萃取仪处理时间为20-30分钟，处理温度为80-90℃。

作为对上述技术方案的进一步改进，其中步骤(3)中乙醇-(NH₄)₂SO₄双水相体系中乙醇、(NH₄)₂SO₄和PBS的重量比是0.5:0.32:1，且双水相体系和牡蛎多糖粗提液的比例为：10：1，粗提液浓度约为9mg/mL。

本发明的另一目的在于提供一种采用上述方法制备的太平洋牡蛎中性多糖。

本发明的再另一目的在于提供一种上述太平洋牡蛎中性多糖在制备免疫相关的药物中的应用。

本发明的再另一目的在于提供一种太平洋牡蛎中性多糖在制备抗肿瘤药物中的应用。优选地，其中所述肿瘤为肝癌。

本发明具有以下优点：