[发明专利]一种新颖玛咖生物碱及其制备方法和应用

权利要求书

1.所述的具有新颖的六氢咪唑[1,5-c]噻唑类生物碱，分子式为C₁₄H₁₄N₂O₃S₂，该化合物命名为(+)-玛咖素A，英文名为(+)-meyeniin A。其结构式为：

。

2.一种权利要求1所述的生物碱的制备方法，所述制备方法是以十字花科植物独行菜属植物玛咖 (Lepidium meyenii Walp.) 的根茎为原料，经有机溶剂提取、液液萃取、MCI除杂、硅胶柱层析、高压液相色谱提取分离步骤而得到；具体步骤为：

A、有机溶剂提取：将十字花科植物独行菜属植物玛咖 (Lepidium meyenii Walp.) 的根茎碎到20~40目，用有机溶剂超声提取3~5次，每次60~120分钟，提取液抽滤合并；旋转蒸发仪减压蒸馏浓缩提取液，从而得到玛咖浸膏a；

B、液液萃取：浸膏a中加入重量比1~3倍量的水，搅拌制备成悬浊液，转移到分液漏斗或萃取器中，用与水等体积且与水不混溶的有机溶剂萃取3~5次，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏b；

C、MCI除杂：浸膏b，用重量比2~5倍量的甲醇水溶解，上MCI柱，用80%-90%甲醇水洗脱，合并洗脱液，减压浓缩成浸膏c；

D、硅胶柱层析划段：将浸膏c用重量比2~3倍量的甲醇或者丙酮溶解，用浸膏重1~3倍的80~100目硅胶拌样，然后上硅胶柱层析（装柱硅胶为100~200目），用量为浸膏c重量5~10倍量；用体积比为1:0~0:1的混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；

E、制备高效液相色谱富集：用制备高效液相色谱，以体积含量40~90%甲醇 (或乙腈) 水溶液洗脱得到的洗脱液，即得所述的(+)-玛咖素A的粗品，纯度为40~60%；该步骤所述的高效液相色谱分离纯化是以40~90%甲醇 (或乙腈) 水溶液为流动相，流速10~14 mL/min，21.2×250 mm，5m 的Zorbax PrepHT GF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为202和254 nm，每次进样10~1000 μL，收集10~25min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的(+)-玛咖素A的粗品；

F、半制备高效液相色谱纯化：(+)-玛咖素A的粗品经半制备高效液相色谱分离纯化，即得所述的(+)-玛咖素A纯品，纯度为90~98%；该步骤所述的高效液相色谱分离纯化是以40~90%甲醇 (或乙腈) 水溶液为流动相，流速1~4 mL/min， 9.4× 250 mm， 10 μm 的Zorbax SB-C18反相半制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为202，220，254，和280 nm，每次进样1~100 μL，收集10~25min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的(+)-玛咖素A的纯品。

3.根据权利要求2所述的生物碱的制备方法，其特征是：A和C步骤所述的有机溶剂为70~100%的丙酮、90~100%的乙醇、90~100%的乙酸乙酯或90~100%的甲醇。

4.根据权利要求2所述的生物碱的制备方法，其特征是：B和D步骤所述的有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醚或石油醚，其体积配比为20:1，9:1，8:2，7:3，6:4，1:1，1:2和0:1。

5.一种权利要求1和2所述的生物碱在抗癌药物、功能食品、保健品中的应用；以(+)-玛咖素A为原料进行体外抗肿瘤活性评价，其对HL-60、A549和MCF7细胞株具有较好的细胞毒活性，IC₅₀值分别达14.41、32.22和33.14 μM；本发明化合物结构新颖且生物活性显著，可作为抗癌药物的先导性化合物，具有一定的研究价值和应用前景。