[发明专利]淋球菌、梅毒螺旋体、沙眼衣原体、解脲脲原体的杂交膜条和检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于医学检测领域，具体的是涉及淋球菌、梅毒螺旋体、沙眼衣原体、解脲脲原体的杂交膜条和检测试剂盒。

背景技术

淋球菌(Neisseria gonorrhoeae，NG)/梅毒螺旋体(Treponema pallidum，TP)/沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis，CT)/解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum，UU)是临床比较常见的通过性传播的微生物。淋球菌主要引起泌尿生殖系统的化脓性感染，如淋菌性尿道炎和宫颈炎，感染初期临床上无症状，若未及时治疗，还可经由尿道或宫颈局部扩散感染，引起附睾炎、盆腔炎等疾病。解脲脲原体感染后可引起尿道炎、宫颈炎和前庭大腺炎；上行感染时，可引起男性前列腺炎或附睾炎，女性子宫内膜炎、盆腔炎和输卵管炎，是不孕不育的重要原因。沙眼衣原体感染后，在男性患者中可出现非淋菌性尿道炎、附睾炎、前列腺炎等；在女性患者中会出现子宫颈炎、尿道炎、盆腔炎等，若感染后不能得到及时诊断和治疗，会产生一系列严重并发症，如输卵管源性不孕、异位妊娠等疾病。梅毒是由梅毒螺旋体(亦称苍白螺旋体)感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可累及人体多系统多脏器的损害，产生多种多样复杂的临床症状和体症，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命。故及时且精准的实验室病原体检测对早期性病患者的治疗有重要意义。目前用于检测这四种病原微生物(NG/TP/CT/UU)常见的实验方法有培养法、镜检法、酶免检测法、金标法和核酸扩增荧光探针法等，培养法检测方法虽然准确可靠，但存在耗时长、费用高、检出率低，需要高标准的实验室条件和运输条件等；酶免检测通过抗原抗体的结合反应，检测血清中的针对上述四种微生物特异性抗体。其方法简便快速但灵敏度和特异性各方面仍有待提高，核酸扩增荧光探针法通过检测上述微生物特异性的核酸序列来判断样品中是否存在相应微生物，此方法兼具灵敏度和特异性，但仍存在费用高，需要特殊仪器设备和专业技术人员操作，无法一次性检测四种病原微生物等缺点。上述方法在进行普筛时，或存在周期长、操作复杂的缺点，或存在成本高、实验条件、专业技术要求高的缺点。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种快速检测淋球菌、梅毒螺旋体、沙眼衣原体、解脲脲原体的试剂盒，该试剂盒具有很好的特异性以及敏感性，可用于快速检测淋球菌、梅毒螺旋体、沙眼衣原体、解脲脲原体。

实现上述目的的技术方案如下。

一种快速检测淋球菌、梅毒螺旋体、沙眼衣原体、解脲脲原体的试剂盒，包括有：

(1)杂交膜条，所述杂交膜条的硝酸纤维素膜上固定有以下至少一种探针：针对淋球菌、沙眼衣原体、梅毒螺旋体、解脲脲原体的分别与SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.16完全互补的寡核苷酸序列；

(2)扩增引物：包括与(1)相应地针对淋球菌、沙眼衣原体、梅毒螺旋体、解脲脲原体的扩增引物分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2，SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4，SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6，SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8中至少一对扩增引物，针对淋球菌、沙眼衣原体、梅毒螺旋体、解脲脲原体的扩增引物的正向引物的5’端分别连接有SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.16的标签序列，所述扩增引物的反向引物连接有第一显色标记物。

在其中一个实施例中，还包括有微球，所述微球上连接有能与第一显色标记物对应结合的第二显色标记物，优选地，所述第一显色标记物为生物素，第二第二显色标记物为链酶亲和素。

在其中一个实施例中，所述杂交膜条的硝酸纤维素膜上固定有四种探针：针对淋球菌、沙眼衣原体、梅毒螺旋体、解脲脲原体的分别与SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.15、和SEQ ID NO.16完全互补的寡核苷酸序列。

本发明的另一个目的是提供一种用于检测淋球菌、梅毒螺旋体、沙眼衣原体、解脲脲原体的杂交膜条。

具体技术方案如下。

一种用于检测淋球菌、梅毒螺旋体、沙眼衣原体、解脲脲原体的杂交膜条，包括有PVC板，PVC板上粘贴有硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上固定有以下至少一种探针：针对有淋球菌、梅毒螺旋体、沙眼衣原体、解脲脲原体的分别与SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.16完全互补的寡核苷酸序列。