[发明专利]基于核酸适配体检测汞离子的电化学传感器及其制备方法有效
| 申请号： | 201710066555.X | 申请日： | 2017-02-07 |
| 公开（公告）号： | CN106841350B | 公开（公告）日： | 2019-03-26 |
| 发明（设计）人： | 李慧;韩聪;刘素;王玉;黄加栋 | 申请（专利权）人： | 济南大学 |
| 主分类号： | G01N27/327 | 分类号： | G01N27/327 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 张世静 |
| 地址： | 250022 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 核酸 体检 离子 电化学传感器 及其 制备 方法 | ||
1.一种基于核酸适配体检测汞离子的电化学传感器，其特征在于，其包括电极，所述电极上依次修饰有HAP层和Helper层；
所述的HAP层中HAP的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；
所述的Helper层中含有Helper1、Helper2、Hg2+、Nt . BbvCI；
所述Helper1的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；
所述Helper2的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
2.根据权利要求1所述的电化学传感器， HAP层的厚度为15±2nm、Helper层的厚度为10±2nm。
3.一种权利要求1或2所述的电化学传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）对电极进行预处理；
（2）将HAP修饰到电极表面形成HAP层；
（3）将Helper1和Helper2修饰到电极表面形成Helper层；
所述HAP的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；
所述Helper1的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；
所述Helper2的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）具体操作步骤如下：将10μM的HAP滴加10μL到经过预处理的电极表面，在37℃下孵育2h。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）操作步骤如下：
① 将灭菌水，1X的buffer缓冲液、1μL 10μM 的Helper1、1μL 10μM 的Helper2、1μL核酸限制性内切酶Nt. BbvCI和1μL待测目标物加入离心管中，震荡30s，放入37℃的恒温箱中孵育2h；
② 将孵育好的混合溶液滴加到修饰好HAP层的电极上，将电极继续放在37℃的恒温箱中孵育2h，清洗。
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）对电极进行预处理操作为电极在0.3和0.05 µm的氧化铝浆中进行抛光处理，直到呈镜面，用PBS和二次水冲洗。
7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述电极为金电极。
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