[发明专利]一种高温全二维液相色谱装置及其使用方法

说明书

本发明公开了一种高温全二维液相色谱装置及其使用方法，包括两套高压二元液相色谱泵、两支色谱柱、一个柱温箱、一个切换阀、一个制冷模块和一个检测器。通过第一维采用纯水为流动相，以程序升温进行洗脱，将第一维的洗脱液经切换阀和定量管收集并连续导入到第二维中分析，实现高温全二维液相色谱的高效分离。本发明由于第一维为纯水洗脱，相对于第二维反相液相色谱为弱溶剂，避免了二维RPxRP液相色谱系统中溶剂不匹配问题。同时具有在线操作快速和连续操作的优点；第一维使用纯水为流动相，符合绿色化学的要求。

技术领域

本发明属于色谱仪技术领域，具体涉及一种高温全二维液相色谱装置。

背景技术

对于复杂组分的分析,仅使用一种色谱模式往往不能提供足够的分辨率和系统峰容量,难以实现复杂样品(如中药提取物、蛋白质组学样品和环境污染物等)的完全分离，对样品的定性和定量分成造成了极大的障碍，往往需要离线进行二次分离才能获得较纯的样品。未实现完全分离的样品，与后续质谱联用也存在样品离子化效率低，加合物复杂的问题。因此，追求高效分离手段是分析科学的重要发展方向之一。根据正交分离的机理，二维液相色谱的灵活性在于能够便捷地实现不同模式之间的偶联。一维分离中反相(RP)、离子交换(IEX，包括阳离子交换和阴离子交换)、体积排阻(SEC)和正相色谱法(NP)等各种机理均可以用于构建二维液相色谱系统，提高分离的选择性和峰容量。因为与ESI-MS的兼容性较好，RP一般用作第二维。以IEXxRP联用较为成熟，因为第一维的流动相为水，不对第二维反相的分离产生影响，可以实现两种分离机理的偶合，因而获得了蛋白质组学的青睐。但是，IEX柱效较低，因此IEXxRP二维系统的总体峰容量不高，而RPxRP具有非常高的峰容量，但两维的流动相不匹配问题，使得该体系的进一步使用受到极大限制。流动相不匹配，即第一维的洗脱液经过样品管收集并转移到第二维色谱柱之后，由于分离机理相同，第一维的洗脱液对第二维的分离产生不良影响。这种影响存在于NPxRP，RPxRP，以及HILICxRP等系统中，导致了这些系统的难以获得实质性的应用。

因此，有必要解决二维RPxRP液相中流动相不匹配的问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种高温全二维液相色谱装置及其使用方法，解决两维溶剂不匹配问题。

本发明提供一种高温全二维液相色谱装置，第一高压二元液相色谱泵、第二高压二元液相色谱泵、第一色谱柱、第二色谱柱、柱温箱、切换阀和检测器，所述切换阀具有第一阀位、第二阀位、第三阀位、第四阀位、第五阀位、第六阀位、第七阀位和第八阀位，所述第一高压二元液相色谱泵连接第一色谱柱的输入端，所述第一色谱柱设置于所述柱温箱内，所述第一色谱柱的输出端连接第一阀位，样品管A的输入端连接第二阀位，样品管A的输出端连接所述第三阀位，所述第四阀位连接废液瓶，样品管B的输入端连接所述第七阀位，所述第八阀位连接所述第二高压二元液相色谱泵，样品管B的输出端连接所述第五阀位，所述第六阀位连接所述第二色谱柱的输入端，所述第二色谱柱的输出端连接所述检测器。

进一步的技术方案，所述高温全二维液相色谱装置还包括制冷模块，所述制冷模块设置于所述第一色谱柱与第一阀位之间的管路上。

进一步的技术方案，所述高温全二维液相色谱装置还包括预热模块，所述预热模块设置于所述第一高压二元液相色谱泵和第一色谱柱之间的管路上。

进一步的技术方案，所述第一色谱柱为耐高温的氧化钛、氧化锆、石墨化碳或聚合物色谱柱中的任意一种，所述第二色谱柱为硅胶基质的C18色谱柱。

进一步的技术方案，所述切换阀为两个六通阀连接或八通阀、或十通阀。

进一步的技术方案，所述切换阀还具有第九阀位和第十阀位，所述第一阀位、第二阀位、第九阀位、第四阀位、第七阀位、第八阀位、第三阀位、第十阀位、第六阀位和第五阀位按顺时针方向排列。