[发明专利]一种从牛血清中提取白蛋白和球蛋白的方法及利用牛血的方法

权利要求书

1.一种从牛血清中提取白蛋白和球蛋白的方法，其特征在于，其包括：

取牛血清，离心得第一上清液，向所述第一上清液中加入0.8-1.2倍于所述第一上清液体积的4-6mM的pH为7.0-7.4的PBS；搅拌下加入(NH₄)₂SO₄至48％-52％饱和度；经冷藏、静置后抽滤得第一滤液和第一沉淀；

从所述第一滤液中提取白蛋白；

从所述第一沉淀中提取球蛋白；

从所述第一沉淀中提取所述球蛋白包括：

溶解所述第一沉淀，加入(NH₄)₂SO₄至30％-35％饱和度，并调节pH至6.5-7.0，经搅拌、静置离心后得第三沉淀；

溶解所述第三沉淀，加入(NH₄)₂SO₄至30％-35％饱和度，经搅拌、静置离心后得第四沉淀；

溶解所述第四沉淀，加入(NH₄)₂SO₄至18％-22％饱和度，经搅拌、静置离心后得第三上清液；

往所述第三上清液中加入(NH₄)₂SO₄至30％-35％饱和度，经搅拌、静置离心后得第五沉淀；

溶解所述第五沉淀得到粗球蛋白溶液，所述粗球蛋白溶液经脱盐处理并冷冻干燥后得到所述球蛋白；

从所述第一滤液中提取所述白蛋白包括：

向所述第一滤液加入保护剂并加热至变性温度，使杂蛋白变性；抽滤得第二滤液；

往所述第二滤液中加入(NH₄)₂SO₄至60％-64％饱和度，并调节pH至4.4-4.8，静置离心得第二沉淀；

溶解所述第二沉淀，透析后离心得到第二上清液，透析浓缩所述第二上清液得到浓缩液；

所述浓缩液经脱盐处理，得到白蛋白溶液，所述白蛋白溶液经冷冻干燥得到所述白蛋白。

2.根据权利要求1所述的从牛血清中提取白蛋白和球蛋白的方法，其特征在于，所述变性温度为55-65℃。

3.根据权利要求2所述的从牛血清中提取白蛋白和球蛋白的方法，其特征在于，加热至所述变性温度后，维持所述变性温度，继续加热20-40min。

4.根据权利要求1所述的从牛血清中提取白蛋白和球蛋白的方法，其特征在于，所述保护剂为辛酸钠，所述辛酸钠在所述第一滤液中的终浓度m:v为0.15％-0.19％。

5.根据权利要求1所述的从牛血清中提取白蛋白和球蛋白的方法，其特征在于，所述脱盐处理为：将所述浓缩液经过Sephadex G-50柱脱盐。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的从牛血清中提取白蛋白和球蛋白的方法，其特征在于，所述(NH₄)₂SO₄均为(NH₄)₂SO₄饱和溶液。

7.一种利用牛血的方法，其特征在于，其包括：

从牛血中分离出牛血清；

按照权利要求1-6中任一项所述的从牛血清中提取白蛋白和球蛋白的方法从所述牛血清中提取牛血清白蛋白以及牛血清球蛋白。

8.根据权利要求7所述的利用牛血的方法，其特征在于，从所述牛血中分离出所述牛血清的步骤包括：将所述牛血于35-38℃下，保温静置2-4h，2-8℃冷藏12-16h，吸取上层析出的黄色液体，得到所述牛血清。