[发明专利]一种丛枝菌根真菌的扩繁方法

说明书

技术领域

本发明涉及菌根真菌扩繁技术领域，尤其涉及一种丛枝菌根真菌的扩繁方法。

背景技术

丛枝菌根真菌是一种广泛分布的土壤微生物，丛枝菌根真菌能够改善宿主根系营养吸收情况而增强作物综合抗性。目前对于真菌的扩繁方法很多，对于丛枝菌根真菌多采用普通土壤或细沙栽培三叶草等植物，利用根系与菌根真菌的共生来培养扩繁，具体培养方法有以下几类：

1、沙土盆栽培养法：

大多数常规培养均是采用沙土盆钵培养，即将丛枝菌根真菌的孢子接种于活动三叶草等植物生长的盆钵基质中，最终获得丛枝菌根真菌的混合菌剂，该方法的主要优点是操作简便、简单可靠，是丛枝菌根真菌的主要扩繁方法，但由于沙土营养条件差，透气不保水，因而影响了菌剂的扩繁，导致培养周期长、繁殖体产量少。

2、玻璃珠分室培养法：

玻璃珠分室培养法是利用不同孔径的尼龙网将有机玻璃盒隔成5室或3室，将孢子和种子置于植物生长室内，植物根系可以透过筛网到达菌根室，只有菌丝可以穿过孔径更小的尼龙网到达真菌室，植物室填充的介质是土壤，菌根室填充的是河沙，真菌室填充的是直径1-3mm的玻璃珠。该方法的优点是能培养基质与丛枝菌根真菌分开，获得纯净的丛枝菌根真菌菌体，但是其技术难度较大，仅供科学研究和小规模接种剂的生产使用，无法大规模培养生产。

3、静止营养液培养法：

利用白三叶草在灭菌的营养液中培养，将三叶草种子和丛枝菌根真菌孢子与沙基质混合放在有筛网的穴盘中，穴盘放在营养液中进行培养，菌丝体和根系穿过网筛在营养液中生长，获得的菌根和营养液都可以做为接种菌剂，但这种方法需要特殊的装置，成本较高，也无法在实际生产中大规模应用。

4、雾化培养法

利用气雾培养箱将预接种丛枝菌根真菌的宿主植物架在空中，然后对其根系采用喷雾即每隔数秒向宿主植物根系喷射超声雾化的营养液，满足根系对水分和营养的需求，可在无土条件下大量生产含有丛枝菌根真菌的须根，本方法的优点是菌剂纯度高，质量轻，但是由于雾化成本高，且雾化培养系统对营养液要的参数较多，尤其是对磷和pH的控制要求高，因此技术难度大也影响了技术应用。

虽然丛枝菌根真菌作为生物肥料具有很好的功效，但目前仍缺少一种适用于规模产业化生产的丛枝菌根真菌的扩繁方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种丛枝菌根真菌的扩繁方法。本发明提供的丛枝菌根真菌的扩繁方法操作简便、成本低、扩繁效率高，能够实现菌剂的大规模生产和应用。

本发明提供了一种丛枝菌根真菌的扩繁方法，包括以下步骤：

1)将丛枝菌根真菌接种于基质进行培养，所述基质包括沸石、浮石、蛭石和泥炭；

2)在所述步骤1)的基质中先后播种玉米、万寿菊和三叶草；所述每种植物的播种密度独立地为(8～12)个/m²；

3)以玉米的播种时间为基准，植物生长4～6个月后，将地下部分的菌根进行干燥、粉碎，与培养该丛枝菌根真菌的基质混合。

优选的是，所述沸石、浮石、蛭石和泥炭的体积比为(10～15)：(2～4)：(2～4)：1。

优选的是，所述沸石、浮石、蛭石和泥炭的体积比为12:3:3:1。

优选的是，所述基质的粒径小于2.5mm。

优选的是，所述丛枝菌根真菌的接种量为基质质量的5～10％。

优选的是，所述步骤1)中的培养在通风条件中进行。

优选的是，所述丛枝菌根真菌包括Glomus intraradices或Glomus mosseae。

优选的是，所述接种前对基质进行灭菌。

优选的是，所述步骤3)植株生长的过程中，施加水和肥料，所述肥料包括N、K和Mg元素。

本发明提供了丛枝菌根真菌的扩繁方法。通过各培养条件的设置，本发明提供的丛枝菌根真菌的扩繁方法操作简便、成本低、菌根侵染率高，真菌产量高，扩繁效率高，能够实现菌剂的大规模生产和应用。试验结果表明，本申请菌根侵染率高达99％。

附图说明

图1为本发明实施例3提供的外源多胺对AMF及宿主植株根系活力的影响结果图；

图2为本发明实施例3提供的外源多胺对AMF根系侵染率的影响结果图。

具体实施方式

本发明提供了一种丛枝菌根真菌的扩繁方法，包括以下步骤：

1)将丛枝菌根真菌接种于基质进行培养，所述基质包括沸石、浮石、蛭石和泥炭；