[发明专利]一种黄曲霉毒素适配体亲和柱及其制备方法和用途在审
| 申请号: | 201710037561.2 | 申请日: | 2017-01-19 |
| 公开(公告)号: | CN106970172A | 公开(公告)日: | 2017-07-21 |
| 发明(设计)人: | 张彦明 | 申请(专利权)人: | 北京美正生物科技有限公司 |
| 主分类号: | G01N30/60 | 分类号: | G01N30/60;G01N30/06;G01N33/544 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 102101 北京市延庆县*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 黄曲霉 毒素 适配体 亲和 及其 制备 方法 用途 | ||
1.一种黄曲霉毒素B1的适配体亲和柱,其特征在于包含有载体和黄曲霉毒素B1适配体。
2.根据权利要求1中所述的亲和柱,其特征在于适配体通过化学键偶联在载体上。
3.根据权利要求1中所述的亲和柱,其特征在于所述的适配体是核酸适配体,更具体的是寡聚脱氧核苷酸适配体。
4.根据权利要求3中所述的核酸适配体,其特征在于所述的适配体序列为序列1所描述的核酸序列。
5.根据权利要求1中所描述的适配体,其特征在于适配体是经过化学修饰的适配体。
6.根据权利要求5中所描述的适配体,其特征在于修饰方式包括但不限于氨基修饰、羧基修饰、巯基修饰及生物素修饰。
7.根据权利要求1中所述的适配体亲和柱,其特征在于所述的载体是琼脂糖凝胶或者化学合成的固相载体。
8.根据权利要求5中所述的亲和柱,其特征在于所述的琼脂糖凝胶包含但不限于N-羟基琥珀酰亚胺活化的琼脂糖凝胶、溴化氰活化的琼脂糖凝胶、交联的琼脂糖凝胶、聚丙烯酸琼脂糖凝胶、。
9.根据权利要求5中所描述的化学合成的固相载体载体,包括但不限于聚苯乙烯,多孔聚苯乙烯及交联多孔聚苯乙烯填料。
10.一种纯化黄曲霉毒素B1亲和柱制备方法,其特征在于
选择N-羟基琥珀酰亚胺活化后的载体,将载体干粉用1mmol/L的盐酸浸泡过夜进行活化;
每克活化的载体加入30-200nmol的适配体,在0.1M NaHCO3,0.5M NaCl PH8.3的缓冲液中,室温偶联2小时,或者4℃偶联过夜;
偶联产物用1M Tris.HCl PH 8.0 室温反应2小时;
偶联好的载体-适配体,用20mM PH7.4的PBS洗涤;
用含有0.01%硫柳汞的10mM PBS PH7.4 洗涤黄曲霉毒素B1适配体-载体偶联产物,装柱,放于4℃保存。
11.一种黄曲霉毒素B1的适配体亲和柱,其用途在于对待检物中的黄曲霉毒素B1的富集和纯化。
12.根据权利要求11所述的待检物,其特征在于待检物包含但不限于粮食、饲料、牛奶及乳制品、调味料、水产、血液、尿液和水。
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