[发明专利]一种牛大力组织培养育苗方法

说明书

技术领域

本发明涉及中草药材栽培技术，具体涉及一种牛大力育苗的方法，尤其是牛大力的组织培养育苗方法，属于中药材栽培技术领域。

背景技术

牛大力为豆科崖豆藤属植物美丽崖豆藤,学名：Millettia specisoa Champ，牛大力以根入药，主要成份为蛋白质、淀粉质及生物碱等。属于药食同源，既可以入药，也可以食用。牛大力的药用价值有：养肾补虚，强筋活络，有平肝、润肺之功效，主治肾虚，对气虚、腰酸腿痛、风湿病、慢性肝炎、支气管炎、咳嗽、肺结核等有很好的疗效。

牛大力是制药企业加工中成药、保健品的常用原料,又是一种非常好的滋补品，很多人使用牛大力熬汤，味道甘香甜口，口味极佳，随着人们生活水平逐渐提高以及保健意识的不断增强，牛大力的用途越来越多，因此牛大力的需求量越来越大，人们对野生资源的滥采乱挖又使野生牛大力濒临灭绝，为满足需要，人们不得不发展人工种植技术。开展牛大力人工栽培，首先要解决牛大力育苗问题，现有技术中，牛大力育苗有种子和扦插苗。主要存在成苗率低，只有40%～55%，开叉多，生长慢，产量低，品质差，且种植两年以上的植株才会开花结子，难形成产业化的缺陷。

发明内容

发明目的：本发明的目的是针对现有技术的缺陷，提供一种组织培养育苗方法，提高牛大力育苗成苗率，生长整齐，性状优良，根系数量较多，均能膨大成薯，而且能保持牛大力母本药用成分，移栽后生长快，可大面积进行牛大力人工栽培。

技术方案：本发明所述的一种牛大力组织培养育苗方法，具体包括以下步骤：

1. 采种：选健壮、无病虫害的野生牛大力植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可采种。

2.培养无菌苗：将牛大力种子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒20～25分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗3次，每次浸洗10分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养。

3.制备诱导培养基：以MS为基本培养基，加入植物激素苄基嘌呤（BA）进行诱导培养，浓度为1.5～2.5mg/L，同时加入3%的蔗糖和0.6%～0.8%的琼脂，培养基温度保持28℃～30℃，PH值5.5～5.8。

4.丛生芽诱导：当步骤2培养的无菌苗长至7～8厘米后，切取上部2～3厘米长的顶芽茎段，接入步骤3诱导过的培养基培养到有丛生芽形成。

5.丛生芽继代增殖：丛生芽诱导至平均高达5～6厘米时，将丛生芽切成2芽一簇，转至另一步骤3诱导过的培养基培养至每簇增殖至45～50个丛生芽。

6.诱导生根：当继代增殖的丛生芽有70%长至3～4厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，直到基部切口开始分化出根。

7. 炼苗：将发育良好，具有2～3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗5～6天后取出小苗，用清水洗去根部的培养基，在有65%～70%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气30～40分钟，喷水雾保持空气湿度80%以上，10天后，可揭去薄膜，按常规管理。

有益效果：本发明与现有技术相比，其有益效果是：

本发明的牛大力育苗方法，取材方便，丛生芽诱导率达65%～80%，成苗达85%以上，生长整齐，性状优良，根系数量较多，均能膨大成薯，可以满足人工大量栽培的需要，而且经过薄层色谱技术鉴定，本方法培养出的试管苗保持牛大力母本药用成分，移栽后生长快，可大面积进行牛大力人工栽培，形成产业化。

具体实施方式

下面结合具体实施事例对本发明技术方案进行详细说明。

实施例1：一种牛大力组织培养育苗，具体步骤如下：

1. 采种：选健壮、无病虫害的野生牛大力植株作采种母株，霜降节气过后，种子成熟，即采种；

2. 培养无菌苗：将牛大力种子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒20分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗3次，每次浸洗10分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养；

3.制备诱导培养基：以MS为基本培养基，加入植物激素苄基嘌呤（BA）进行诱导培养，浓度为1.5mg/L，同时加入3%的蔗糖和0.6%的琼脂，培养基温度保持28℃℃，PH值5.5；

4.丛生芽诱导：当步骤2培养的无菌苗长至7厘米后，切取上部2厘米长的顶芽茎段，接入步骤3诱导过的培养基培养至有丛生芽形成；

5.丛生芽继代增殖：丛生芽诱导至平均高达5厘米时，将丛生芽切成2芽一簇，转至另一步骤3诱导过的培养基培养至每簇增殖至45个丛生芽；