[发明专利]微藻生物质的蛋白质富集方法有效
| 申请号: | 201680080727.2 | 申请日: | 2016-02-08 |
| 公开(公告)号: | CN108699581B | 公开(公告)日: | 2023-02-28 |
| 发明(设计)人: | 马里·勒吕耶;劳伦特·塞盖拉;梅勒妮·卡佩尔;西尔万·德拉罗什 | 申请(专利权)人: | 科比恩生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12P21/00 | 分类号: | C12P21/00;C12N1/12;C12N1/38;C12P13/10;C12P13/14 |
| 代理公司: | 中原信达知识产权代理有限责任公司 11219 | 代理人: | 金海霞;杨青 |
| 地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 生物 蛋白质 富集 方法 | ||
1.一种异养培养的微藻的蛋白质富集方法,所述微藻是小球藻(Chlorella)属的微藻,其特征在于,所述方法包含:
-第一步骤,所述第一步骤包括限制铵供应,从而获得具有按N.6.25表示的小于50%的蛋白质含量的微藻生物质;
-第二步骤,所述第二步骤包括增加发酵培养基中的铵供应,从而获得大于50%的蛋白质含量,
并且其特征在于,在所述第一步骤中用NH3/KOH混合物进行pH调节,并且在所述第二步骤中仅用NH3进行pH调节。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述第一步骤包括限制铵供应,从而获得具有按N.6.25表示的小于30%的蛋白质含量的微藻生物质。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述第一步骤包括限制铵供应,从而获得具有按N.6.25表示的在20%和25%之间的蛋白质含量的微藻生物质。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在所述第二步骤中增加发酵培养基中的铵供应,从而获得大于60%的蛋白质含量。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在所述第二步骤中增加发酵培养基中的铵供应,从而获得大于65%的蛋白质含量。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述NH3/KOH混合物是70-45%NH3和30-55%KOH,这些量以摩尔表示。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述NH3/KOH混合物是65-55%v/v NH3和35-45%KOH,这些量以摩尔表示。
8.根据权利要求1至7任一项所述的方法,其特征在于,在所述第一步骤与第二步骤之间所述铵供应乘以1.5至2。
9.根据权利要求1至7任一项所述的方法,其特征在于,在所述第一步骤中,所述微藻的氮消耗的比速率小于0.005g/g/h,并且在所述第二步骤中,所述微藻的氮消耗的比速率大于0.01g/g/h。
10.根据权利要求1至7任一项所述的方法,其特征在于,在第一阶段和第二阶段期间生长速率保持不变。
11.根据权利要求1至7任一项所述的方法,其特征在于,在第一阶段和第二阶段期间生长速率保持在0.07h-1至0.09h-1。
12.根据权利要求1至7任一项所述的方法,其特征在于,在第一阶段和第二阶段期间生长速率保持在0.08h-1。
13.根据权利要求1至7任一项所述的方法,其特征在于,所述方法包含:
-分批阶段,其在接种发酵罐之后,供应20g/l的葡萄糖,
-生长速率设定为0.08h-1的指数型补料分批阶段,其开始于所述分批阶段中供应的葡萄糖被完全消耗时,
在此期间,为了获得含有按N.6.25表示的少于25%蛋白质的生物质,通过利用NH3和KOH的混合物进行pH调节来限制铵供应,
以及然后
-具有设定为0.08h-1的相同生长速率的指数型补料分批阶段,在此期间通过利用100%氨水溶液调节pH来解除铵限制。
14.根据权利要求1至7任一项所述的方法,其特征在于,所述方法导致产生的微藻生物质含有相对于构成所述生物质的总氨基酸而言大于45%的谷氨酸和精氨酸。
15.根据权利要求1至7任一项所述的方法,其特征在于,所述小球藻属的微藻是原始小球藻(Chlorella protothecoides)。
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