[发明专利]瘟病毒标记疫苗

说明书

本发明提供了包含嵌合Erns基因的突变瘟病毒，其提供具有逃避血清学检测的能力的突变瘟病毒，但保持良好的疫苗特性和病毒复制。

本发明涉及兽医病毒学和疫苗学的领域。更具体地，本发明涉及具有突变Erns基因的突变瘟病毒，该突变瘟病毒的疫苗和医学用途，突变瘟病毒和疫苗的制备方法，以及使用突变瘟病毒或其突变Erns基因的诊断方法。

黄病毒科的瘟病毒属含有许多与农业产业大大经济相关的动物致病性病毒。瘟病毒在全世界发生，并且可以感染在偶蹄目内不同种的动物。主要病毒成员是感染反刍动物和猪的牛病毒性腹泻病毒型(BVDV)，感染猪的经典猪瘟病毒(CSFV)和感染反刍动物和猪的边界病病毒。不同瘟病毒之间存在可变程度的血清学交叉反应，这在其血清诊断方面引起很大困难。

瘟病毒病毒粒子有包膜并包含具有约12kb的单链、线性、正义RNA基因组的核衣壳。该基因组编码4个结构蛋白和8个非结构蛋白，并被翻译成约3900个氨基酸的一个大多蛋白，其然后被病毒蛋白酶和宿主蛋白酶切割。瘟病毒特征的广泛综述在Fields Virology(第4版 2001, Lippincott Williams & Wilkins, ISBN-10: 0781718325)中关于黄病毒的章节中给出。瘟病毒分子生物学综述于Tautz等人 (2015, Adv. in Virus Res., Vol.93, 章节2, p. 47- 160)中。

瘟病毒糖蛋白的特征的综述在Wang等人(2015, Viruses, vol. 7, p. 3506-3529)中给出。免疫显性蛋白是包膜糖蛋白Erns和E2，以及非结构蛋白NS3；这些中，E2诱导病毒中和抗体。Erns包膜糖蛋白对瘟病毒属的病毒是独特的，并且具有许多功能：在其N端和C端，存在切割信号用于从多蛋白释放它。Erns蛋白的中心区域与RNA酶活性相关，所述RNA酶活性可干扰双链RNA，并且以该方式影响被感染的宿主细胞的干扰素应答。Erns蛋白的C端侧具有膜缔合信号。目前已知的Erns基因长度在666和681个核苷酸之间，编码222和227个氨基酸之间的Erns蛋白。在文献中，Erns蛋白也被称为E0(E零)、gp48或gp44-48。

在瘟病毒属内，存在血清学和遗传上密切相关的核心病毒组。该核心组由四种官方病毒种组成：BVDV-1、BVDV-2、CSFV和边界病病毒。关于基于Erns蛋白的相关性，一些非官方种也落入该组：来自驯鹿和长颈鹿的分离株，以及HoBi瘟病毒(也称为HoBi样，或BVDV-3)。参见：Hause等人 (2015, J. of Gen. Virol., vol. 96, p. 2994-2998)，其呈现目前已知的瘟病毒'种'的相关性的概述；Erns蛋白的相关性在该参考文献的第2997页的图1，小图C中呈现。

几种分离株或(部分)基因组已知为血清学和/或遗传上与该核心组关系更远的瘟病毒的，并且更加继续待发现。为了增加相对于基于Erns蛋白的核心组的距离，这些是：羚羊瘟病毒(也称为：叉角羚)；Bungowannah病毒；挪威大鼠瘟病毒(NRPV)；且最远的是非典型猪瘟病毒(APPV)和中菊头蝠瘟病毒(RaPV)。

Bungowannah瘟病毒于2003年在澳大利亚被鉴定为猪的心肌炎、死胎和死亡的原因。Bungowannah病毒的表征在Kirkland等人(2015, Vet. Microbial., vol. 178, p.252-259)中给出。Bungowannah病毒也是WO 2007/121.522的主题。

挪威大鼠瘟病毒由Firth等人(2014, Mbio, vol. 5, e01933-14)描述；APPV在Hause等人, 2015 (同上)中描述；且RaPV由Wu等人(2012, J. of Virology, vol. 86, p.10999-11012)描述。

CSFV引起经典猪瘟或猪霍乱，这是严重的出血性疾病，其对猪动物来说通常是致命的。该严重的临床疾病引起大量动物患病，和依赖于商业猪养殖及其产品的部门的巨大经济损失。CSFV的垂直传播通过胎儿的胎盘感染是可能的。此外，猪可变成慢性感染，引起病毒的持续水平传播。