[发明专利]通过密度梯度进行流体分离的装置和方法

说明书

一种用于离心容器、具体为管的装置，该装置用于分离具有所需密度范围的液体馏分，具体为发明应用于形成悬浮液的生物流体和/或液体，其特征在于，所述装置具有分隔件(7)，该分隔件(7)将容器(1)的内部分隔成竖直布置的至少两个室——上室(2)和下室(3)，并且具有分隔件(7)的装置具有可与引导件(12)对齐的孔(4)，在其上的液体、具体为流体样本可以从离心容器(1)的上室(3)向下流至下室(4)。本发明还包括用于通过使用根据本发明的装置从包含不同密度的馏分的样本中分离出具有所需密度范围的馏分的方法。

技术领域

本发明涉及一种装置、具有该装置的容器以及借助密度梯度离心分离进行流体分离的方法。同时，本发明涉及一种执行该方法的套件。具体地，本发明用于分离诸如动物血液、人体血液的体液，以进行类似临床诊断或研究的进一步分析。本发明涉及实验室用的容器领域，具体地涉及专用离心管/容器。本发明的另一用途涉及与通过确定其化学、物理或生物特性进行的材料测试或分析，具体为液体生物材料、例如血液的分析相关联的的领域。

背景技术

包括血液的流体样本的采集、净化、分离成各种馏分和/或保存在医学诊断以及临床试验中都起着重要作用。在用于大规模采集血液样本的常规系统和方法的情况下，从患者获得的血液样本可以通过离心、过滤或淘析分离成不同的馏分，并存储以备后用或进一步测试。分离的血液成分通常包括红细胞、白细胞、血小板和血浆的馏分。血液分离成其馏分可以在血液采集期间连续进行，或者在血液采集后分阶段进行。对于许多治疗应用和临床试验用途而言，至关重要的是血液分离成其各种馏分在高度无菌条件下进行。

存在很多血液分离成其各种馏分的方法。现有技术的方法对于其正确操作来说，要求使用高质量的专业医疗设备以及训练有素的人员。

从国际专利申请WO8805331已知一种将红细胞(红血球)与白细胞(白血球)分离的技术。它涉及将血液样本与工作溶液混合，工作溶液接着使红细胞聚集，结果凝集的红细胞的沉降速度增加。分离流体的密度调节成使得白细胞的沉降过程仅稍微改变。这可以防止白细胞沉淀在容器底部，在分离之后，白细胞可以从分离的血液样本的上部收集，同时红细胞沉淀到容器底部。

还有另一种技术，其中红细胞聚集的工作溶液不与血液混合，血液样本被小心地分层到工作分离流体的表面上。结果，红细胞开始凝集或聚集在血液和分离液之间的界面表面上并沉降到管的底部。有几种众所周知的引起红细胞凝集的基于聚合物的化合物，例如FICOLL 400(瑞典Pharmacia精细化学公司)。血液的分离可以在重力的影响下或在离心的影响下进行。作为分离的效果，大部分白血细胞保留在液体界面处。然而，这种方法不能将白细胞分离成亚群，例如，分离成外周血单核细胞(PBMC)和多形核细胞(PMN)。最需要的方法将包括一步式过程，其中分离介质具有允许同时将白血细胞分离成亚群的密度。

为了分离白细胞亚群，已知的用于离析单核白血细胞(PBMC)的方法之一采用密度梯度离心分离。在该方法的第一步中，正在使用Isopaque-Ficoll(挪威Nyegaard&Co.公司)与作为主要成分的metrizoat的混合物。该方法的第二步使得能够采用葡聚糖或明胶从血液中离析出PMN馏分，这导致红细胞的沉淀增加。另一种方法使用不连续的密度梯度，其中两种或两种以上的工作流体被小心地分层在彼此之上。密度选择成使得非连续梯度处于最佳要求范围内——其根据分离物质的密度来选择。

又一美国专利申请No.US4824560A公开了具有至少两个相邻室的管状容器的旋转方法和装置，所述室通过狭窄的毛细管状开口相互连接。工作原理如下：工作流体放置在下室中，待分离成各馏分的流体施加在上室中。不需要任何特殊的预防措施来避免液体在离心分离前混合。与上述手动方法相比，该方法具有几个优点。它也具有缺点，因为即使在离心期间，两个室之间的狭窄开口也阻止血细胞在两个室之间的有效通过，结果血液分离的效率降低。