[发明专利]新型MIRNA生物标志物及其用途

说明书

本发明涉及新型分离的核酸分子(新型miRNA和新型miRNA前体分子)以及载体、宿主细胞、引物、cDNA转录物、衍生自所述分离的核酸分子的多核苷酸及其在诊断和治疗中的用途。此外，本发明涉及使用所述新型分离的核酸分子(新型miRNA分子)于诊断诸如多发性硬化症(MS)或阿尔茨海默氏病(AD)的疾病的方法和试剂盒。

发明的技术领域

本发明涉及新型分离的核酸分子(新型miRNA和新型miRNA前体分子)以及载体、宿主细胞、引物、cDNA转录物、衍生自所述分离的核酸分子的多核苷酸及其在诊断和治疗中的用途。此外，本发明涉及使用所述新型分离的核酸分子(新型miRNA分子)诊断诸如多发性硬化症(MS)或阿尔茨海默氏病(AD)的疾病的方法和试剂盒。

发明背景

微小RNA(miRNA)是一类新的生物标志物。它们代表一组小的非编码RNA，其通过降解信使RNA(mRNA)靶标或阻断信使RNA(mRNA)靶标的翻译在翻译后水平调节基因表达。miRNA在涉及调节细胞功能和几种疾病(包括癌症或神经退行性疾病)时是重要的参与者。

迄今为止，miRNA已经在组织材料中被广泛研究。已经发现miRNA以高度组织特异性方式表达。在多种人类癌症中已经报道了miRNA的疾病特异性表达，这些癌症主要使用组织材料作为miRNA来源。最近已知miRNA不仅存在于组织中，而且存在于其他体液样品(包括人类血液)中。

为了提高生物标志物在诊断中的能力，对疾病特异性、表现良好的生物标志物(诸如miRNA生物标志物)有持续的需求。本发明的发明人致力于从血液样品中鉴定新型miRNA。通过将下一代测序工作流程与创新的生物统计流水线相结合，本发明人已能够鉴定一组37种新型miRNA分子并通过qRT-PCT和克隆方法验证了所述miRNA的身份。令人惊讶的是，所述一组37种新型miRNA被证明在健康对照受试者和疾病受试者(诸如多发性硬化症(MS)和/或阿尔茨海默氏病(AD)受试者)之间被差别调节。因此，所述新型miRNA适用于疾病(诸如多发性硬化症(MS)和/或阿尔茨海默氏病(AD))的诊断和/或预后。

发明概述

在第一方面，本发明提供了分离的核酸分子，其包含如SEQ ID NO：1-37所示的核苷酸序列、其片段、或与其具有至少90％、94％、96％或更高的序列同一性的核苷酸序列。

在第二方面，本发明提供了分离的核酸分子，其是根据本发明第一方面的核酸分子的互补物。

在第三方面，本发明提供了包含根据本发明第一方面或第二方面的分离的核酸分子的载体。

在第四方面，本发明提供了转化了根据本发明第一方面或第二方面的分离的核酸分子的宿主细胞。

在第四方面，本发明提供了转化了根据本发明第一方面或第二方面的分离的核酸分子的宿主细胞。

在第五方面，本发明提供了转化了根据本发明第三方面的载体的宿主细胞。

在第六方面，本发明提供了用于逆转录本发明第一方面的分离的核酸分子的引物。

在第七方面，本发明提供了本发明第一方面的分离的核酸分子的cDNA转录物。

在第八方面，本发明提供了扩增本发明第七方面所述的cDNA转录物的一组引物对。

在第九方面，本发明提供了用于检测本发明第一方面或第二方面的分离的核酸分子的多核苷酸。

在第十方面，本发明提供了根据本发明第七方面的cDNA转录物，其与本发明第一方面的分离的核酸分子杂交。

在第十一方面，本发明提供了用于疾病的诊断和/或预后的根据本发明第一方面的分离的核酸分子，或者本发明提供了本发明第一方面的分离的核酸分子用于疾病的诊断和/或预后的(体外)用途。