[发明专利]用于产生去细胞化组织支架的方法和装置有效
| 申请号: | 201680050591.0 | 申请日: | 2016-07-29 |
| 公开(公告)号: | CN108026509B | 公开(公告)日: | 2021-07-06 |
| 发明(设计)人: | G·马扎;W·沃-阿卡德;M·平扎尼 | 申请(专利权)人: | UCL商业有限责任公司 |
| 主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;A61L27/36;B01L3/00;C12M1/33 |
| 代理公司: | 北京三友知识产权代理有限公司 11127 | 代理人: | 庞东成;褚瑶杨 |
| 地址: | 英国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 产生 细胞 组织 支架 方法 装置 | ||
1.一种产生去细胞化组织支架的方法,其包括:
(I)提供组织样品,
(II)用渗透剂处理所述组织样品,和
(III)用洗涤剂处理由步骤(II)得到的所述组织样品,
其中,重复步骤(II)和(III),并且其中,在步骤(II)和(III)期间,使所述组织样品以1mm以上的位移和3至100Hz的频率在单个线性维度上进行振荡,所述振荡使组织样品受到6ms-2至50ms-2的G力,
由此产生去细胞化组织支架。
2.如权利要求1所述的方法,其中,以3Hz至75Hz使所述组织样品进行振荡。
3.如权利要求1所述的方法,其中,所述振荡具有5mm至50mm的位移。
4.如权利要求1所述的方法,其中,所述组织样品是肾脏、肌肉、骨、脂肪、软骨、肺、膀胱、角膜、皮肤、肝、脾、胎盘、肠脏、胰腺、前列腺、乳腺或心脏。
5.如权利要求1所述的方法,其中,所述渗透剂是低渗剂。
6.如权利要求5所述的方法,其中,所述低渗剂是去离子水。
7.如权利要求1所述的方法,其中,所述洗涤剂包括聚乙二醇对(1,1,3,3-四甲基丁基)苯基醚(Triton X100TM)。
8.如权利要求1所述的方法,其中,所述洗涤剂包括十二烷基硫酸钠(SDS)。
9.如权利要求1所述的方法,其中,所述洗涤剂包括脱氧胆酸钠(SdC)。
10.如权利要求1所述的方法,其中,用蛋白酶与所述洗涤剂组合处理所述组织样品。
11.如权利要求10所述的方法,其中所述蛋白酶是胰蛋白酶。
12.如权利要求1所述的方法,其中,所述组织样品中的细胞在步骤(I)中被机械性损伤。
13.如权利要求12所述的方法,其中,通过冷冻和融化所述组织样品而使所述细胞机械性损伤。
14.如权利要求1所述的方法,其包括:
(a)使由步骤(I)得到的所述组织样品暴露于去离子水,
(b)重复步骤(a)0至50次,
(c)使由步骤(b)得到的所述组织样品暴露于洗涤剂和蛋白酶2分钟,
(d)使由步骤(c)得到的所述组织样品暴露于洗涤剂和蛋白酶4分钟,
(e)重复步骤(d),
(f)使由步骤(e)得到的所述组织样品暴露于盐水,
(g)重复步骤(f)0至10次,
(h)重复步骤(a)至(e)0至10次,
(i)使由步骤(h)得到的所述组织样品暴露于盐水,
(j)重复步骤(i)0至10次。
15.如权利要求1所述的方法,其包括:
(a)使由步骤(I)得到的所述组织样品暴露于去离子水,
(b)重复步骤(a)4次,
(c)使由步骤(b)得到的所述组织样品暴露于洗涤剂和蛋白酶2分钟,
(d)使由步骤(c)得到的所述组织样品暴露于洗涤剂和蛋白酶4分钟,
(e)重复步骤(d),
(f)使由步骤(e)得到的所述组织样品暴露于盐水,
(g)重复步骤(f)4次,
(h)重复步骤(a)至(e),
(i)使由步骤(h)得到的所述组织样品暴露于盐水,
(j)重复步骤(i)2次。
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