[发明专利]用于改善免疫细胞的功效和扩张的方法

权利要求书

1.一种扩张和/或活化免疫细胞(例如，免疫效应细胞)群体的方法，包括：

将编码第一嵌合抗原受体(CAR)分子的核酸在适于瞬时表达CAR分子的条件下引入免疫细胞群体中，由此产生表达第一CAR的细胞群体，其中CAR分子包含抗体分子的抗原结合结构域；和

使表达第一CAR的细胞群体与选自相应抗原分子(例如，重组抗原分子)或抗抗原独特型抗体分子的CAR抗原结合结构域的配体在出现免疫细胞扩张和/或活化的条件下接触，由此产生扩张的和/或活化的免疫细胞群体。

2.一种扩张和/或活化免疫细胞(例如，免疫效应细胞)群体的方法，包括：

提供表达第一CAR的细胞群体，所述表达第一CAR的细胞群体包含瞬时表达的第一CAR分子，并且所述CAR分子包含抗体分子的抗原结合结构域；和

使所述表达CAR的细胞群体与选自相应抗原分子(例如，重组抗原分子)或抗抗原独特型抗体分子的CAR分子的配体在出现免疫细胞扩张和/或活化的条件下接触，由此产生扩张的和/或活化的免疫细胞群体。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中免疫细胞群体的扩张和/或活化在体外、离体或体内实施。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中从来自受试者(例如，癌症患者)的血液样品取得(例如，获得)免疫细胞群体，例如，通过单采血液成分术取得。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中免疫细胞群体包含选自T细胞(例如，α/βT细胞和γ/δT细胞)、B细胞、天然杀伤(NK)细胞、天然杀伤T(NKT)细胞、肥大细胞、髓系衍生的吞噬细胞或它们的组合的免疫效应细胞。

6.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中免疫细胞群体包含原代T细胞或淋巴细胞亚群，所述淋巴细胞亚群选自无反应性T细胞、幼稚T细胞、调节性T细胞，Th-17细胞、干T细胞或它们的组合。

7.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中免疫细胞群体包含外周血单个核细胞(PBMC)、脐带血细胞或它们的组合。

8.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中免疫细胞群体包含表达低水平功能性T细胞受体、实质上受损的该受体或没有该受体的细胞。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中配体是相应的抗原分子。

10.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中配体是抗抗原独特型抗体分子。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，其中CAR分子的配体固定至或连接至非天然存在的基质，例如，基质表面。

12.根据权利要求11所述的方法，其中非天然存在的基质是选自板、膜、基体、芯片或珠(例如，磁珠)的固相支持物。

13.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，其中CAR分子的配体存在于细胞(例如，在细胞表面上表达异源相应抗原的细胞)的表面上。

14.根据权利要求13所述的方法，其中例如通过淋巴结注射或通过注射肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)至肿瘤中，在体内扩张T细胞。

15.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中编码第一CAR分子的核酸是RNA分子，例如，体外转录的(IVT)RNA。

16.根据权利要求1-15中任一项所述的方法，其中第一CAR分子在免疫细胞群体中瞬时表达有限的时间段或细胞复制次数，例如，少于50天(例如，少于40、30、25、20、15、10、5天或更少天数)。