[发明专利]促滤泡素抑制素相关的融合蛋白及其用途

说明书

相关申请

本申请要求于2015年3月26日提交的美国临时申请号62/138,886(现在未决)的权益。上述申请的内容和公开内容通过引用整体并入本文。

背景技术

转化生长因子-β(TGF-β)超家族含有多种具有共同的序列元件和结构基序的生长因子。已知这些蛋白质对脊椎动物和无脊椎动物两者中的多种细胞类型发挥生物作用。超家族的成员在胚胎发育期间在图式形成和组织特化中执行重要功能，并可影响多种分化过程，包括脂肪形成、肌生成、软骨发生、心脏发生、血细胞生成、神经发生和上皮细胞分化。超家族成员具有不同的、通常互补的作用。通过操控TGF-β家族成员的活性，常常可在生物体中引起重要的生理变化。肌肉、骨骼、软骨和其它组织的变化可以通过增加或拮抗由合适的TGFβ超家族成员介导的信号传导来实现。

通常称为配体陷阱(ligand trap)的天然存在的蛋白质作为TGFβ超家族配体的细胞外调节剂起作用。这样的配体陷阱以可溶形式或附着于细胞外基质起作用，并通常通过结合受体激活所需的表位来螯合配体。配体陷阱的一个家族包括促滤泡素抑制素和促滤泡素抑制素相关蛋白，其基于多个证据链而具有理想的功能活性，但已经证明难以用作治疗剂。因此，需要作为TGFβ超家族信号传导的有效调节剂起作用的这样的试剂。

发明内容

部分地，本公开内容提供了包含促滤泡素抑制素相关融合蛋白的异聚蛋白复合物。这样的异聚蛋白复合物任选表现出对配体例如激活素A、激活素B、激活素C、激活素E、GDF8和GDF11的高亲和力结合和抑制，并且任选地在重组细胞系中表现出改善的生产，改善的纯化性质和/或相对于天然形式的促滤泡素抑制素相关蛋白延长的血清半衰期。

在某些方面，本文所述的蛋白复合物包含与第二多肽共价或非共价缔合的第一多肽，其中第一多肽包含促滤泡素抑制素相关多肽的氨基酸序列和相互作用对的第一成员的氨基酸序列，并且第二多肽包含相互作用对的第二成员的氨基酸序列。在其它方面，本文所述的蛋白复合物包含与第二多肽非共价缔合的第一多肽，其中第一多肽包含促滤泡素抑制素相关多肽的氨基酸序列和相互作用对的第一成员的氨基酸序列，并且第二多肽包含相互作用对的第二成员的氨基酸序列。

本文所述的促滤泡素抑制素相关多肽包含与SEQ ID No:1-33任一个具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列，基本上由其组成，或由其组成。任选地，所述促滤泡素抑制素相关多肽直接连接至相互作用对的第一成员，或间插序列例如接头可位于促滤泡素抑制素相关多肽的氨基酸序列与相互作用对的第一成员的氨基酸序列之间。接头的实例包括序列TGGG、TGGGG、SGGGG、GGGGS和GGG。任选地，第一多肽可以包含位于相互作用对的第一成员或促滤泡素抑制素相关多肽的C端和/或N端的另外的氨基酸(例如1-50、1-40、1-30、1-20或1-10个氨基酸)。位于相互作用对的第一成员或促滤泡素抑制素相关多肽的C端或N端的此类另外的氨基酸可赋予生物学活性。或者，此类另外的氨基酸可不赋予或基本不赋予生物学活性。任选地，此类另外的氨基酸对于所述促滤泡素抑制素相关多肽是异源的，优选不是促滤泡素抑制素相关多肽。

第二多肽可以基本上由相互作用对的第二成员组成或由其组成。任选地，第二多肽可以包含位于相互作用对的第二成员的C端和/或N端的另外的氨基酸(例如1-50、1-40、1-30、1-20或1-10个氨基酸)。位于相互作用对的第二成员的C端或N端的此类另外的氨基酸可赋予生物学活性。或者，位于相互作用对的第二成员的C端或N端的此类另外的氨基酸可不赋予或基本上不赋予生物学活性。任选地，位于相互作用对的第二成员的C端或N端的此类另外的氨基酸对于所述促滤泡素抑制素相关多肽应该是异源的，并且优选不是促滤泡素抑制素相关多肽。