[发明专利]具有广泛pH活性范围的酶作为促消化药物的用途

权利要求书

1.两种或更多种脂肪酶的组合在制备用于治疗脂质消化缺陷的药物中的用途，其中至少一种脂肪酶在酸性pH值下具有最适pH，而至少一种其它脂肪酶在碱性pH值下具有最适pH，所述在酸性pH值下具有最适pH的至少一种脂肪酶由选自SEQ ID No. 4或SEQ ID No. 6的氨基酸序列组成，并且其中所述在酸性pH值下具有最适pH的至少一种脂肪酶是由纤毛虫目的生物体编码、表达和/或产生的脂肪酶；所述在碱性pH值下具有最适pH的至少一种其它脂肪酶由SEQ ID No. 5的氨基酸序列组成，并且其中所述在碱性pH值下具有最适pH的至少一种其它脂肪酶是由纤毛虫目的生物体编码、表达和/或产生的脂肪酶。

2.根据权利要求1的用途，其中所述脂质消化缺陷是胰腺外分泌功能不全。

3.根据权利要求1的用途，其中至少一种脂肪酶的最适pH是通过尼克松试验或滴定试验测定的。

4.根据权利要求1的用途，其中至少一种脂肪酶已经通过定点或随机突变和随后的选择进行了修饰。

5.根据权利要求1的用途，其中一种脂肪酶具有的最适pH是在哺乳动物的胃中存在的pH值，而至少一种其它脂肪酶具有的最适pH是在哺乳动物小肠下段中存在的pH值。

6.根据权利要求1-5中任一项的用途，其中一种脂肪酶具有的最适pH在pH值≥1和≤6范围内。

7.根据权利要求1-5中任一项的用途，其中一种脂肪酶具有的最适pH在pH值≥8和≤11范围内。

8.一种生产根据权利要求1-7中任一项所述的两种或更多种脂肪酶的组合的方法，其中所述方法包括以下步骤：a) 在一个或多个合适的生产系统中表达所述两种或更多种脂肪酶，以及b) 纯化在步骤a)中表达的所述两种或更多种脂肪酶。

9.根据权利要求8所述的方法，其中至少一种脂肪酶是通过在纤毛虫目的生物体中同源表达产生的。

10.根据权利要求8或9的方法，其中至少一种脂肪酶是通过过表达产生的，或通过同源过表达产生的。

11.两种或更多种核酸分子的组合，其中一种核酸分子编码选自SEQ ID No. 4或SEQID No. 6的氨基酸序列；且一种其他核酸分子编码SEQ ID No. 5的氨基酸序列。

12.药物制剂，其包含两种或更多种脂肪酶的组合，其中至少一种脂肪酶具有的最适pH在pH值≥1和≤6范围内，且其中至少一种其他的脂肪酶具有的最适pH在pH值≥8和≤11范围内，所述具有的最适pH在pH值≥1和≤6范围内的至少一种脂肪酶由选自SEQ ID No. 4或SEQ ID No. 6的氨基酸序列组成，并且其中所述具有的最适pH在pH值≥1和≤6范围内的至少一种脂肪酶是由纤毛虫目的生物体编码、表达和/或产生的脂肪酶；所述具有的最适pH在pH值≥8和≤11范围内的至少一种其他的脂肪酶由SEQ ID No. 5的氨基酸序列组成，并且其中所述具有的最适pH在pH值≥8和≤11范围内的至少一种其他的脂肪酶是由纤毛虫目的生物体编码、表达和/或产生的脂肪酶。