[发明专利]非人动物表现出上运动神经元功能和下运动神经元功能以及感知减弱

权利要求书

1.一种经基因修饰的啮齿动物基因组，所述啮齿动物基因组中包含经修饰的内源性DR6基因座，所述经修饰的内源性DR6基因座包含

(i)编码成熟DR6蛋白的核苷酸序列的缺失，和

(ii)包含功能性DR6信号肽编码序列的核酸序列，所述功能性DR6信号肽编码序列可操作地融合至ROR1跨膜结构域编码序列，所述ROR1跨膜结构域编码序列可操作地连接至编码报告基因蛋白的基因，

其中包含所述啮齿动物基因组的啮齿动物表达所述功能性DR6信号肽，所述功能性DR6信号肽可操作地融合至可操作地连接至所述报告基因蛋白的ROR1跨膜结构域中并且发展出

(a)表现为一种或多种ALS样症状的运动神经元功能紊乱，

(b)脊髓中运动神经元的损失，

(c)相对于对照啮齿动物的伤害感受减弱，或者

(d)上述(a)、(b)、(c)的任意组合，以及

其中所述啮齿动物基因组为大鼠基因组，所述啮齿动物为大鼠，或其中所述啮齿动物基因组为小鼠基因组，所述啮齿动物为小鼠。

2.根据权利要求1所述的经基因修饰的啮齿动物基因组，其中所述功能性DR6信号肽为内源性DR6信号肽。

3.根据权利要求2所述的经基因修饰的啮齿动物基因组，其中所述报告基因蛋白为β半乳糖苷酶。

4.根据权利要求1所述的经基因修饰的啮齿动物基因组，其中所述核酸序列可操作地连接至内源性DR6转录调控序列。

5.根据权利要求1所述的经基因修饰的啮齿动物基因组，其中所述经基因修饰的啮齿动物基因组对于所述经修饰的内源性DR6基因座是杂合的。

6.根据权利要求1所述的经基因修饰的啮齿动物基因组，其中所述经基因修饰的啮齿动物基因组对于所述经修饰的内源性DR6基因座是纯合的。

7.根据权利要求1所述的经基因修饰的啮齿动物基因组，其中所述啮齿动物存在表现出一种或多种ALS样症状的运动神经元功能紊乱。

8.根据权利要求7所述的经基因修饰的啮齿动物基因组，其中所述运动神经元为上运动神经元或下运动神经元。

9.根据权利要求8所述的经基因修饰的啮齿动物基因组，其中在所述啮齿动物大于4周龄以前，所述运动神经元功能紊乱在盲法主观神经系统评分测定、转杆测试、猫步测试、旷场测试和体重测量中并不明显。

10.根据权利要求1所述的经基因修饰的啮齿动物基因组，其中与对照啮齿动物相比，包含所述啮齿动物基因组的所述啮齿动物表现出伤害感受减弱。

11.根据权利要求1所述的经基因修饰的啮齿动物基因组，其中与对照啮齿动物相比，包含所述啮齿动物基因组的所述啮齿动物存在表现出一种或多种ALS样症状的运动神经元功能紊乱和伤害感受减弱。

12.根据权利要求1所述的经基因修饰的啮齿动物基因组，其中所述基因组为小鼠基因组。

13.根据权利要求12所述的经基因修饰的啮齿动物基因组，其中所述小鼠基因组包含经修饰的内源性DR6基因座，所述经修饰的内源性DR6基因座

(i)缺少编码SEQ ID NO:15第1-614位氨基酸的核酸序列，并且

(ii)包含可操作地连接至内源性DR6转录调控序列的如SEQ ID NO:17所示的核酸序列。

14.根据权利要求13所述的经基因修饰的啮齿动物基因组，其中所述小鼠基因组来自选自129品系、C57BL/6品系和混合C57BL/6×129品系的品系，并且其中包含所述小鼠基因组的所述小鼠与介于8周龄和20周龄之间的对照野生型动物相比表现出体重增加减缓。