[发明专利]一种北美海棠的组织培养方法

权利要求书

1.一种北美海棠的组织培养方法，其特征在于：该北美海棠的组织培养方法具体步骤如下：

S1：培养基的制作，采用MS培养基作为培养基体，培养基的制作需要在无菌环境下进行，且MS培养基的PH值控制在5.6-6.0；

S2：繁殖枝条的处理：

对北美海棠植株的选择，选择北美海棠植株时需要注意避免选择有病变的植株体，

选择表面较为洁净的枝条作为备选材料，备选枝条不仅需要洁净要求，同时需要注意枝条上需要有至少3个腋芽，

对枝条的剪切，将确定选择的枝条剪切下来，剪切时注意避免对枝条上腋芽和表皮破坏，

枝条的清洁，将枝条放入到流动水下进行反复的冲洗，流动水下冲洗后，采用硫磺消毒肥皂水用软毛刷蘸取对枝条表皮进行洗刷，注意保护表皮完好，尤其需要注意对腋芽进行保护，

流动水的再次冲洗，采用流动水将枝条上的肥皂沫冲洗干净；

S3：繁殖块的处理：

将冲洗洁净的枝条在洁净无菌工作台上切成1-1.5厘米的小段，同时小段上必须带有腋芽，且腋芽处于距离顶端三分之一处，

将切好的繁殖块在75％酒精中进行消毒处理，消毒时间为6-8秒，然后将消毒后的繁殖块在无菌水下冲洗，将酒精冲洗去，在浓度为0.08％氯化汞溶液中进行二次消毒处理，消毒时间为15-25秒，消毒结束后再在无菌水下反复冲洗，将残留的氯化汞溶液冲洗干净，利用洁净无菌吸水纸将繁殖块表面水份去除，

S4：从芽诱导和繁殖阶段，将消毒后的繁殖块放入到MS培养基中进行从芽诱导和繁殖，同时需要向MS培养基中加入浓度为1.0 mg/L的6-BA 和1.5 mg/L的NAA ，6-BA和NAA的重量组份比为1:1，加入培养基中以覆盖培养基表面1㎜为准，在无菌环境下进行培育，直至可以明显的观测到丛生芽为止；

S5：丛生芽的分化培育阶段，将繁殖块取出，将丛生芽切下，换入到新的MS培养基中进行分化培育，同时需要向MS培养基中加入浓度为3.0 mg/L的6-BA 和0.3 mg/L的IAA，6-BA和IAA的重量组份比为2:1，加入培养基中以覆盖培养基表面0.5㎜为准，继续培育直到出现真根；

S6：溶液的培养，在培养基中培养出现真根后转入到去除琼脂的MS培养基溶液中进行培养，从而真根可以更好的生长，转入到培养基溶液中培养一周后可以进行土壤中的栽培，完成北美海棠的组织培养。

2.根据权利要求1所述的一种北美海棠的组织培养方法方法，其特征在于：所述对枝条剪切以后繁殖块的剪切中，需要注意切口的平齐，切口需要保持平整，避免毛口切面的发生。

3.根据权利要求1所述的一种北美海棠的组织培养方法方法，其特征在于：所述在酒精和氯化汞中消毒需要注意消毒时间，避免消毒时间过久导致组织的损坏。