[发明专利]一种稳定同位素标记手性磷试剂及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种稳定同位素标记手性磷试剂，其特征在于其结构式如下：

其中，a为16或18；b为12或13；c为1或2；d为14或15；且不包括a为16，b为12，c为1和d为14的未标记结构；n为1、2、3或5；R为L-或D-氨基酸的侧链取代基(A)-(G)，包括如下结构：

A为N-羟基化合物取代基，包括N-羟基琥珀酰亚胺(I)、N-羟基邻苯二甲酰亚胺(J)、N-羟基戊二酰亚胺(K)、N-羟基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亚胺(L)、1-羟基苯并三氮唑(M)及3-羟基-4-氧-3,4-二氢-1,2,3-苯并三氮嗪(N)，化学结构如下：

2.如权利要求1所述一种稳定同位素标记手性磷试剂，其特征在于所述n为1、2和3；R为L-或D-氨基酸的侧链取代基(A)、(B)和(G)；N-羟基化合物取代基为N-羟基琥珀酰亚胺(I)及1-羟基苯并三氮唑(M)。

3.如权利要求1所述稳定同位素标记手性磷试剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

步骤1：稳定同位素标记的醇1的制备：

在10～60℃的温度范围内，卤代烷烃与水在含有银盐与有机溶剂的混合体系中搅拌反应，反应6～72h后得到产物1；

步骤2：稳定同位素标记的亚磷酸酯2的制备：

产物1与亚磷酸二苯酯按摩尔比2︰1在有机溶剂中反应，反应中加入0.1～10当量的碱，反应时间为1～12h，反应完后浓缩除去有机溶剂，经柱层析分析得到产物亚磷酸酯2；

步骤3：稳定同位素标记的N-磷酰化氨基酸3的制备：

冰浴条件下，2与四氯化碳按摩尔比1︰2混合加入氨基酸水-有机溶剂混合溶液中，反应中加入0.1～10当量的碱，反应2～4h后升至室温，再反应1～12h，反应完成后浓缩除去有机溶剂，用盐酸溶液调节pH＝2～4，乙酸乙酯萃取，浓缩残余产物重结晶得到N-磷酰化氨基酸3；

步骤4：稳定同位素标记N-磷酰化氨基酸活化酯4的制备：

3与N-羟基化合物按摩尔比1︰1.2在有机溶剂中反应，反应中加入1.5当量的脱水缩合试剂，反应1～12h，反应完后过滤除去沉淀，浓缩除去有机溶剂，重结晶得到N-磷酰化氨基酸活化酯4；其中，A为N-羟基化合物，包括N-羟基琥珀酰亚胺(I)、N-羟基邻苯二甲酰亚胺(J)、N-羟基戊二酰亚胺(K)、N-羟基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亚胺(L)、1-羟基苯并三氮唑(M)及3-羟基-4-氧-3,4-二氢-1,2,3-苯并三氮嗪(N)。

4.如权利要求3所述稳定同位素标记手性磷试剂的制备方法，其特征在于所述N-羟基化合物为N-羟基琥珀酰亚胺(I)及1-羟基苯并三氮唑(M)。

5.如权利要求3所述稳定同位素标记手性磷试剂的制备方法，其特征在于在步骤1中，所述卤代烷烃采用含C₁～C₆的直链或支链的氯代、溴代或碘代烷烃。

6.如权利要求5所述稳定同位素标记手性磷试剂的制备方法，其特征在于所述卤代烷烃为溴代或碘代的烷烃。

7.如权利要求3所述稳定同位素标记手性磷试剂的制备方法，其特征在于在步骤1中，所述卤代烃中的C是碳-12或碳-13，H是氢-1或氢-2；

所述水中的O是氧-16或氧-18；

所述银盐是无机酸的银盐或含C₁～C₆的羧酸的银盐；

所述有机溶剂是醚类溶剂。