[发明专利]一种CPV与白僵菌的杀虫悬浮剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物农药加工技术领域，具体地说，涉及一种CPV与白僵菌的杀虫悬浮剂及其制备方法。

背景技术

马尾松毛虫质型多角体病毒(Dendrolimus punctatus Cypovirus，DPCPV)为我国重大森林害虫松毛虫的致病原，对松毛虫有良好的控制效果。1989年，Belloncik S研究发现质型多角体病毒(Cytoplasmic polyhedrosis virus，CPV)感染昆虫中肠上皮细胞，其突出特点是对环境无毒无害，持续感染效果非常好，容易造成害虫流行病。赵同海等人(2004)研究发现DpCPV宿主范围较广，可以使10科36种鳞翅目昆虫感染发病。防治原理：在林内释放松毛虫质型多角体病毒，通过松毛虫的取食，造成松毛虫大面积的流行病，最终导致大量死亡。一般当代感染率在70％以上，因而大大的降低虫口密度，促进生态的良性循环。此外，该病毒还具有水平和垂直传播的效果，不污染环境，不杀伤天敌，能够起到持续防控的作用，这不但大大降低防治成本，而且增加了木材的收益，同时减少化学农药的使用量，改善松林的生态环境。

球孢白僵菌(Beaueria bassaria(Balsamo)Vuillemin)是一种昆虫病原真菌，作为活体生物农药，在寄主虫体内大量繁殖，使体液机能发生变化，新陈代谢紊乱以致死亡。由于白僵菌无毒、无味、无污染，已广泛用于农林害虫防治中。白僵菌可以用来防治松毛虫、蛴螬、家蝇、茶小绿叶蝉、介壳虫、白粉虱、蚜虫、蓟马、马铃薯叶甲、玉米螟、天牛、金龟子等40多种农林害虫。但是不同地理种群或不同株系的球孢白僵菌对害虫的毒力存在较大的差异，即使同一株系的球孢白僵菌对不同种类害虫的毒理也不相同，因此在真菌的生物防治中针对不同种类的害虫经常要筛选高毒力菌株；另外，白僵菌防治效果受环境湿度较大，在相对湿度较低时，防治效果并不理想，且杀虫速度相对较慢，影响了其在农林害虫防治上的积极性。

昆虫病毒是一种良好的生物杀虫剂，是生物防治的重要手段之一。昆虫病毒杀虫剂具有特异性强、致病力高、稳定性好、安全和不污染环境，用后能引起害虫群体病毒性疾病流行传播，可自然控制害虫消长，并导致相继世代流行病的死亡。但是昆虫病毒杀虫剂仍存在诸多问题，解决病毒增殖技术和降低生产成本是病毒商品化生产的关键问题之一。

发明内容

有鉴于此，本发明针对上述的问题，提供了一种CPV与白僵菌的杀虫悬浮剂及其制备方法，该复配杀虫剂具有高效、广谱的特点，对人畜无害，不伤害天敌，可广泛应用于森林、蔬菜、棉花、茶叶、果树等害虫的防治。

为了解决上述技术问题，本发明公开了一种CPV与白僵菌的杀虫悬浮剂，包括有效活性成分松毛虫质型多角体病毒悬液和球孢白僵菌粉，所述的松毛虫质型多角体病毒悬液和球孢白僵菌粉的重量比为1︰12～2︰1。

进一步地，该CPV与白僵菌的杀虫悬浮剂按照质量百分比包括以下组分：

进一步地，松毛虫质型多角体病毒悬液通过以下方法制备得到：松毛虫质型多角体病毒，替代宿主为棉铃虫，用100万PIB/mL病毒悬液感染人工饲料饲养的4龄棉铃虫幼虫，生产松毛虫质型多角体病毒。按重量计，该棉铃虫幼虫的人工饲料配方是：黄豆粉5-15％，蔗糖0.4-0.8％，玉米粉5-10％，酵母粉2-6％，尼泊尔金0.1-0.5％，山梨酸0.05-0.1％，维生素C0.1-0.5％，琼脂1.5-2.0％；余量为蒸馏水，以上质量百分含量总量为100％；病毒感染替代宿主后4到10天收集病毒致死虫尸处理，加工成200亿PIB/mL的松毛虫质型多角体病毒悬液。

进一步地，球孢白僵菌粉通过以下方法制备：取球孢白僵菌菌种在无菌条件下接入灭菌常用的产孢培养基固体平板进行活化处理；刮取活化好的菌种制成悬液，加入液体产孢培养基进行扩大菌种培养；48小时后，将其接于发酵罐内灭菌后的液体培养基中进行液体发酵；培养24h后，接于待料灭菌后的固体培养料中，混合均匀后，进行固体发酵，固体培养物产孢好后进干燥房进行烘干处理，待固体培养物彻底干燥后，在密闭的抽提机上进行球孢粉的提取，最终得到白僵菌球孢粉。

进一步地，松毛虫质型多角体病毒株已于2014年10月15日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏号为：CCTCC NO：V201607；球孢白僵菌已于2013年8月22日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏号为：CCTCC NO.7998。

进一步地，纳米级二氧化硅为60nm二氧化硅。

本发明还公开了一种CPV与白僵菌的杀虫悬浮剂的制备方法，包括以下步骤：