[发明专利]牛樟芝素的制备方法

说明书

本发明公开了一种牛樟芝素的制备方法，以鼠尾草酸为原料通过臭氧氧化切断反应、伯奇还原反应、酯缩合反应以及碘代‑消除反应，快速地构建了分子的骨架结构，从而完成了牛樟芝素的不对称全合成。这种牛樟芝素的制备方法可以大量合成的牛樟芝素，合成的牛樟芝素可以用来研究其病理毒理、构效关系，并且通过结构修饰来阐明和改进它的生物活性。

技术领域

本发明涉及一种牛樟芝素的制备方法。

背景技术

Antrocin(牛樟芝素)是由姜宏哲(Hung-Chen Chiang)教授和他的合作者于1994年从中国台湾牛樟芝(又名牛樟菇，非褶菌目、多孔科、多年生蕈菌类，学名为Antrodiacamphorata)中分离出来的，分子结构式为

牛樟芝的活性成分三萜类化合物除个别特殊外在其他薄孔菌属的真菌中也均有发现。但是倍半萜化合物牛樟芝素却唯有在野生牛樟芝的子实体中才能分离到，人工手段培养的牛樟芝尚未有报道分离得到牛樟芝素。

从结构上看，牛樟芝素是一种倍半萜稀内酯，具备一个6.6.5三环结构，包含三个手性中心及两个全碳取代中心。2011年，台湾朝阳科技大学的曾耀铭教授对牛樟芝素的生物活性进行研究。研究发现该分子具有选择性抑制人转移性乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞系的生理活性，其IC50值为0.6μM。2013年，曾耀铭教授又发现牛樟芝素在抑制人非小细胞肺癌细胞有很好的抑制增殖作用，对具野生型表皮生长因子受体(EGFR)的肺癌细胞H441的IC50值为0.75μM，而对具突变型EGFR的H1975肺癌细胞的IC50值0.83μM。

牛樟芝素具有良好的潜在抗癌活性，目前的人工合成报道，而且还未见有不对此合成的报道，因此目前的合成技术尚无法提供充足的牛樟芝素，以对其进行深入的活性及构效关系、毒理病理研究。因此，急需找到一种可以大量合成牛樟芝素的方法，以便提供足够的牛樟芝素来研究其病理毒理、构效关系，并且通过结构修饰来阐明和改进它的生物活性。

发明内容

基于此，有必要提供一种可以大量合成的牛樟芝素的牛樟芝素的制备方法，通过以化合合成手段大量的得到牛樟芝素，以便对牛樟芝素进行结构修饰和活性研究。

一种牛樟芝素的制备方法，包括如下步骤：

步骤一、将结构式为的鼠尾草酸溶解于第一有机溶剂中，然后冷却到-78℃，鼓气通入臭氧，充分反应后得到第一反应液；

步骤二、向所述第一反应液中加入硼氢化钠，剧烈搅拌并充分反应，反应完成后纯化得到结构式为的化合物A，其中，所述鼠尾草酸与所述硼氢化钠的摩尔比为1：3～10；

步骤三、在-78℃的条件下，将所述化合物A溶解于第二有机溶剂中，分批次投入碎钠块，搅拌并充分反应，得到含有结构式为的化合物B和结构式为的化合物C的第二反应液，其中，所述化合物A与所述碎钠块的摩尔比为1：5～20；

步骤四、除去所述第二反应液中的有机溶剂后酸化并萃取所得产物，接着除去萃取剂并加入第三有机溶剂，然后加入对甲苯磺酸，于60℃～100℃下充分反应，反应完成后纯化得到结构式为的化合物D，其中，所述对甲苯磺酸和所述化合物A的摩尔比为0.1～0.5：1；

步骤五、将所述化合物D溶解于第四有机溶剂中，加入碘、三苯基膦和咪唑，搅拌并充分反应，反应完成后纯化得到结构式为的化合物D1，其中，所述碘与所述化合物D的摩尔比为1.1～1.6：1，所述三苯基膦与所述化合物D的摩尔比为1～1.3：1，所述咪唑与所述化合物D的摩尔比为1.2～1.7：1；以及

步骤六、将所述化合物D1溶解于第五有机溶剂中，加入第一有机碱，在80℃下搅拌并充分反应，反应完成后纯化得到牛樟芝素。

在一个实施例中，步骤一中，所述第一有机溶剂为二氯甲烷、甲醇或体积比为1～6：1的二氯甲烷和甲醇的混合液体；